Dosagem glicose

Assunto: Dosagem de acúcar redutor no sangue * Desproteinização e reação da coloração (experimento 1) * Curva de calibraçãob( experimento 2)
Alunos: Estela Lucas
Trabalho apresentado à disciplina de Bioquímica e Biofísica geral I como parte da avaliação do segundo semestre letivo, do 1º período do curso de Medicina Veterinária. Professor: Roberto data: 07/02/2013

INTRODUÇÃO
O objetivo deste experimento é, através do Método Somogyi-Nelson, quantificar a presença do um açúcar redutor nas soluções. “Os monossacarídeos, glicose e frutose são açúcares redutores por possuírem grupo carbonílico e cetônico livres, capazes de se oxidarem na presença de agentes oxidantes em soluções alcalinas” (SITE EBAH).
MATERIAL E MÉTODOS No experimento 1, foi utilizado um tubo de centrífuga, onde foi colocado 3,5ml de água destilada e o,1ml de sangue total, misturou-se e adicionou-se 0,2ml de solução de hidróxido de bário (o,3mol/L), agitando-o e deixando este tubo em repouso durante 5 minutos. Neste tubo, somou-se 0,2ml de sulfato de zinco (5%), misturando e centrifugando durante 1º minutos à 2500rpm.1ml do sobrenadante obtido, foi colocado em um tubo de ensaio nomeado como A, enquanto que, em outro tubo (este nomeado com a letra B ) foi adicionado 1ml de água destilada. Em ambos os tubos, foi adicionado 1ml do reativo de Somogyi, após isso, os tubos foram colocado em banho-maria fervente, onde permaneceram durante 10 minutos ( estes “tampados” com bolas de vidro para evitar a evaporação durante o processo). Ainda nos dois tubos, foi adicionado 1ml de reativo de nelson e misturou-se. Somou-se 7ml de água destilada em cada um dos dois tubos. O tubo B foi utilizado para calibrar o Fotocolorímetro (520nm), afim de determinar a absorbância do tubo A.
No experimento 2, numerou-se 6 tubos de ensaio que possuíam os seguintes reagentes (tabela1): | branco | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | Padrão de glicose diluído 1:10 | - | 0,2 | 0,4 | 0,6 | 0,8 | 1,0 | Água