Cristalografia de proteínas

UNIVERSIDADE FEDERAL DO CEARÁ
CENTRO DE CIÊNCIAS
DEPARTAMENTO DE BIOQUÍMICA E BIOLOGIA MOLECULAR
GRADUAÇÃO EM BIOTECNOLOGIA

DANILO VASCONCELOS GUIMARÃES
JÉSSICA DE MOURA SOARES
MARINA OLIVEIRA SUDÁRIO
MAYUMI DA NÓBREGA ITO
PAULA BARBOSA VENANCIO ALENCAR
ITALO RAVELL DIAS FERREIRA

CRISTALIZAÇÃO DE PROTEÍNAS

FORTALEZA
2012
1.0 Introdução

A cristalização de proteínas é um processo que as moléculas de uma certa proteína se associam de forma ordenada, em solução aquosa, para formar um arranjo periódico e em três dimensões, ou seja, um cristal.
Para formar um cristal é necessário que as proteínas atinjam um estado de supersaturação, que é determinado pelas condições do meio, como a concentração do agente precipitante, concentração da proteína, da temperatura, do pH, da força iônica. Para alcançar essas condições, faz-se necessário um estudo com um grande número de possíveis condições, até que consiga encontrar uma condição que produza cristais com qualidade e as dimensões almejadas.
Para obter os cristais dessas macromoléculas é necessário que ela esteja em uma condição de supersaturação, pois só haverá a formação de cristais se houver um arranjo ordenado de moléculas de proteínas.
A fim de levar a proteína para o estado de supersaturação podemos aumentar sua concentração ou aumentar ou aumentar a concentração de sal presente na solução. Os cristais devem permanecer no estado de metaestável para um maior crescimento.
O processo de cristalização deve ser lento, para que haja um crescimento ordenado.

2.0 Objetivo
Realizar o processo de pré-cristalização afim de estimar as melhores condições para a formação do cristal. Além de verificar em qual otimização da condição do Screen ocorreu melhora no crescimento do cristal, por meio da observação do cristal nos diferentes poços.

3.0Materiais
Placa VDX, Tampão TRIS HCl pH 8,5 em diferentes concentrações, Sulfato de Amônio, Cloreto de Magnésio, lamínula siliconada, microscópio, silicone e