Bioquimica

INSTITUTO DE CIÊNCIAS BIOLÓGICAS - ICB DEPARTAMENTO DE BIOQUÍMICA E BIOLOGIA MOLECULAR

RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS BIOQUÍMICA

AULA PRÁTICA Nº 3

Determinação de Proteínas Totais
Pelo Método do Biureto

Acadêmicos:
Ana Luiza Sieczko
Bruna Souza Cunha
Cleyton Ferreira de Souza
Haenndel Santos
Jordana Vilela Cavalcante
Pâmella Renzzo

Goiânia, 27 de Maio de 2014.

Terceiro relatório apresentado à disciplina de Bioquímica Básica, matéria do curso de Ciências Biológicas da Universidade Federal de Goiás, disciplina orientada pela Prof.ª. Drª. SILVANA PETROFEZA DA SILVA.

INTRODUÇÃO
Algumas proteínas consistem de uma única cadeia polipeptídica, mas outras, denominadas proteínas multissubunitárias, possuem dois ou mais polipeptídeos associados de forma não covalente. As cadeias polipeptídicas individuais em uma proteína multissubunitárias podem ser idênticas ou diferentes. Se pelo menos duas forem idênticas, a proteína é denominada oligomérica, e as unidades idênticas (consistindo de uma ou mais cadeias polipeptídicas) são os protômeros. Outras proteínas contêm duas ou mais cadeias polipeptídicas unidas covalentemente, pela chamada ligação peptídica.
A quantidade de proteína presente em uma solução ou suspensão pode ser medida pelo método do BIURETO. A reação do biureto é devida às ligações peptídicas, dando positiva para proteínas e peptídeos com três ou mais resíduos de aminoácidos.

Procedimento 1

MATERIAS E MÉTODOS

Materiais:

Reativo de biureto (1.5g de CuSO4.5H2O e tartarato de sódio e potássio dissolvidos em água);
Solução de caseína (5gm/ml);
Água destilada
Pipetas graduadas de 1 e 10 ml
7 Tubos de ensaio
Espectrofotômetro
7 Cubetas

Procedimentos:

1º- Adicionou-se as seguintes quantidades de água nos tubos de ensaio.

Tubo B: 1,0 (mL)
Tubo 1: 0,5 (mL)
Tubo 2: 0,8 (mL)
Tubo 3: 0,6 (mL)
Tubo 4: 0,4 (mL)
Tubo 5: 0,2