BIoquimica

Faculdade de Ciências da Saúde

Curso de Bacharelado em Educação Física

Relatório - Aula Prática 2

BIOQUÍMICA APLICADA À EDUCAÇÃO FÍSICA

AULA PRÁTICA 2

Parte 1- Determinação da concentração de glicose
A glicose é o principal combustível de todos os tipos de celulares. Apenas algumas células tem capacidade de armazenamento da glicose e todas captam constantemente glicose da circulação, e por isso, deve sempre haver uma concentração mínima, cerca de 70mg/dL no sangue.
Objetivo: Determinar a concentração de glicose no plasma com método enzimático colorimétrico em condição de jejum.
Princípio: A enzima glicose oxidase (GOD) catalisa a oxidação da glicose de acordo com a reação abaixo.
Material: Pipetas, tubos de ensaio, espectrofotômetro, kit de reagentes. Glicose + O2 + H2O GOD Ácido glucônico + H2O2
O peróxido de hidrogênio (H2O2) formando reage com 4-aminoantipirina e fenol, sob ação catalisadora da enzima peroxidase (POD), numa reação oxidativa de acoplamento formando uma antipirilquinomina vermelha cuja intensidade de cor é proporcional à concentração da glicose na amostra.
2H2O2 + 4-Aminoantipirina + fenol POD antipirilquinonimina + 4H2O

Procedimento: Tomar 3 tubos e proceder como a seguir:

Tubos de ensaio

BRANCO
PADRÃO
AMOSTRA
Reagente(branco)
1,0mL
1,0mL
1,0mL
Padrão
--
0,1mL
--
Amostra
--
--
0,1mL

Mistura e aguarda 15 minutos. Determinar as absorbâncias do padrão e teste em 505 nm. A cor é estável por 60 minutos.
Padrão-> Cor mais escura (Rosa escuro)
Amostra-> Uma cor um pouco mais clara (Rosa claro)
Branco-> Rosa bem claro, quase branco.
Obs: Quanto mais glicose, mais anitipirilquinonimina e mais escuro fica a composição. Anitipirilquinonimina-> Responsável pela cor da composição. Espectrofotômetro

[GLIC] = Abs. da Amostra x F. de calibração