Aula prática extração de dna

Aula Prática: Extração de DNA

Objetivos
1. Obter ácido desoxirribonucléico (DNA) a partir de vegetais.
2. Visualizar o DNA isolado.
3. Conhecer um pouco sobre as diferentes técnicas de extração de DNA usadas em pesquisa e medicina forense.

Protocolo para isolamento de DNA vegetal (cebola ou morango)
A. Material permanente
- 1 Becker 200ml
- 2 Beckers 500ml
- 1 prato
- 1 coador
- garfo, faca e colher de sobremesa
- ralador (se cebola)
- luvas
- recipiente para gelo ou banho-maria gelado
- timer

B. Material para consumo
- água quente a ~ 60°C
- sal
- detergente líquido neutro
- álcool gelado
- gelo ou recipiente com água gelada
- 6 a 8 morangos ou 1 cebola média

C. Procedimentos
1. Aquecer a água.
2. Preparar tampão de extração em um dos Beckers de 500ml, misturando bem: - meio copo de água quente (~ 200ml) - meia colher de sobremesa de sal - 2 colheres sobremesa de detergente
3. Descascar e ralar a cebola, ou picar bem e esmigalhar os morangos (sem o cabo), usando o prato;
4. Misturar bem a cebola ou o morango com o tampão de extração no próprio Becker;
5. Esperar 20 minutos;
6. Filtrar a mistura para o outro Becker de 500ml usando o coador;
7. Esfriar a mistura colocando 2 a 3 cubos de gelo ao redor do Becker (ou em banhomaria gelado); 8. Esperar de 5 a 10 min;
9. Filtrar a mistura para o outro Becker de 500ml usando o coador;
10. Derramar vagarosamente álcool gelado nas bordas do Becker com a mistura filtrada até formar uma camada de 2 a 3cm de álcool sobre a mistura;
11. Após alguns instantes, o DNA começará a aparecer junto com bolhas e poderá ser pescado com o garfo ou colher.
E viva o DNA!!

Atividades:

1. De que é constituído o DNA? Como é sua estrutura?
2. Quais as diferenças entre o DNA e o RNA?
3. Onde se encontra o DNA na célula?
4. Por que é necessário macerar o vegetal?
5. No tampão de extração é utilizado água quente. Por quê?
6. Qual o papel do detergente?
7. Qual a função