Análise Qualitativa de Frações submetidas ao processo de Diálise

1. Objetivo
Realizar análise qualitativa de frações submetidas ao processo de diálise e identificar em qual (is) há proteína. 2. Procedimento
Após um processo de diálise duas frações foram obtidas: 1 e 2.
OBSERVAÇÃO: A fração 1 corresponde ao fluido dentro da membrana de diálise, e a fração 2 ao fluido que permeou a membrana em direção à água do recipiente.
Em seguida foi recolhida uma amostra de cada fração e submetida a um tratamento com HCl 2N e aquecimento, obtendo-se duas frações: 1A e 2A.
I) Submeter cada fração a uma análise qualitativa com os reagentes de identificação molecular descritos abaixo: * Reagente de Biureto (CuSO4 em meio alcalino): Adicionar a 1ml da amostra, 1ml deste reativo agitando continuadamente. Observar.
* Reagente de Lugol (I2/KI em solução aquosa): Adicionar a 1ml da amostra, 5 gotas do reagente de Lugol.
Observar.
* Reagente de Benedict (CuSO4/citrato sódio/Na2CO3): Adicionar a 1ml da amostra 1ml deste reagente.
Aquecer em banho-maria por aproximadamente 5 minutos. Observar.
* Reagente de Ninidrina (hidrato de triceto-hidridendo) (0,2% em acetona): Adicionar a 1ml da amostra,
0,5ml deste reativo. Aquecer em banho-maria e observar.
OBSERVAÇÃO: Fazer um controle negativo para cada reagente, utilizando 1ml de água + volume de cada reagente. II) Após identificar a fração que contém proteína, adicionar a 3 tubos de ensaio 1mL desta fração e a cada um dos tubos, 1mL dos seguintes reagentes: Acetona, Nitrato de prata 10% e Ácido tricloroacético 20%.

1

3. Resultados

3.1. Tabelas

Tabela 1 – Análise por Cor
Controle

1

1A

2

2A

Azul Claro

Roxo

Azul Claro

Azul Claro

Azul Claro

Amarelo

Preto

Amarelo

Amarelo

Amarelo

R. Benedict

Azul Turquesa

Vermelho Tijolo

Vermelho Tijolo

Azul Turquesa

Vermelho Tijolo

R. Ninidrina

Incolor

Rosa

Violeta

Violeta

Violeta

1

1A

2

2A

Azul Claro

+

_

_

_

Amarelo

+

_

_