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PRÁTICA 03
Na prática de número 3, ministrada pelo professor Paulo Roberto, disciplina de Bioquímica, fizemos experimentos para a caracterização das proteínas. Onde identificamos cada tipo de proteína e vimos a propriedade, estrutura e o modo de isolamento da molécula.
Realização:
Amostra de proteínas retiradas de ovo de galinha de acordo com as propriedades de solubilização e precipitação destas macromoléculas.
Reações colorimétricas para a detecção de proteínas. (Utilizando soluções de ninhidrina a 0,1 e de CuSO4 a 1% em meio alcalino).
Reativos:
Solução de proteínas a 10%
Solução de ninhidrina 0,1%
Hidróxido de sódio (NaOH) 2,5 mol/L
Solução de sulfato de cobre (CuSO4) a 1%
Ácido tricloroácetico (TCA) a 10% v/v
Acetato de chumbo a (PbCH3COO-) 5% p/v
Álcool etílico (CH3CH2OH) absoluto
Clara de ovo “in natura”
Cloreto de sódio (NaCl) 1 mol/L
Técnica e Resultado:
Reação de Ninhidrina.
1. Tubo 1 - Em um tubo numerado colocamos 2 mL de ninhidrina e 1 mL de proteína a 10% (com o auxílio de uma pipeta). Depois colocamos a solução em banho maria durante 5 minutos a 100ºC. A coloração da solução antes do banho maria foi incolor, depois ela ficou mais densa e a cor foi lilás mais escura.

Reação de Biureto.
2. Tubo 2 - Colocamos 1mL de água destilada entre de um tubo numerado, logo depois inserimos 5 gotas de NaOH 2,5 mol/L e por último 3 gotas de sulfato de cobre a 1%. Misturamos a solução e ela aderiu a coloração lilás bem clara.

3. Tubo 3 - No tubo de numeração 3 não usamos nenhum tipo proteína, e atingiu a coloração azul. Nele foi colocado 1 mL de água destilada, 5 gotas de NaOH 2,5 mol/L e 3 gotas de sulfato de cobre a 1%
Reação de Precipitação
4. Tubo 4 - No tubo de numeração 4 foi feito reação de precipitação, onde colamos apenas 2 mL de proteína a 10% e após disso foi colocada em banho-maria a 100ºC por 3 minutos. Durante o aquecimento as proteínas se juntaram e quando esfriaram elas ficaram densas e continuaram juntas.

5. Tubo