Testes de carboidratos

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UNIVERSIDADE FEDERAL DE SANTA CATARINA
CENTRO DE CIÊNCIAS FÍSICAS E MATEMÁTICAS
DEPARTAMENTO DE QUÍMICA

Experimento 01
Testes para carboidratos
Carboidratos são desidratados quando tratados com ácidos fortes, sob
condições não oxidantes. Os grupamentos aldeídicos ou cetônicos livres de
monossacarídeos, ou dissacarídeos, são facilmente oxidados por soluções
moderadamente alcalinas deíons cúpricos. Estes carboidratos são chamados de
açúcares redutores porque reduzem os íons cúpricos para formar Cu2O, um
precipitado vermelho tijolo. As aldoses são oxidadas a ácidos aldônicos e cetoses a
produtos de oxidação de baixa massa molecular.
Procedimento: testes poderão ser feitos com diferentes carboidratos, amidos,
frutas, vegetais, feijões etc
01 - Teste de Molisch: teste geralpara carboidratos.
Adicione 10 gotas das soluções 1% de glicose, sacarose e amido em três
tubos de ensaio distintos. Dilua cada solução com 2mL de água. Adicione duas
gotas de solução de α-naftol em cada um dos tubos e agite.
Incline o tubo de ensaio e adicione lenta e cuidadosamente 3 mL de ácido
sulfúrico concentrado para formar uma fase abaixo da solução de açúcar. Não
agite o tubo deensaio! A formação de um anel púrpura na interface indica a
presença de carboidrato. Fazer o teste para todos os carboidratos que fazem parte
da tabela (página 5).
Preparação da solução de α-naftol: dissolva 10 g de alfa naftol em 100 mL de
etanol 95%.
02 - Teste de Barfoed: teste geral para distinguir monossacarídeos de dissacarídeos.
Adicione 2,5mL do reagente de Barfoed a diferentes tubos deensaio e junte
a estes tubos 2,5 mL de solução 1% de diferentes carboidratos. Agite e coloque os
tubos (todos ao mesmo tempo) em banho de água fervente! Aqueça os tubos por
cerca de 3 min. Durante este tempo observe os tubos e anote qualquer mudança
de cor. Teste positivo para monossacarídeos indica a formação de precipitado
vermelho tijolo de Cu2O dentro de 1 a 2 min! A não formação deprecipitado neste
tempo indica a presença de dissacarídeo. Anote os tempos em que as mudanças
1

de coloração aconteceram! Com o intuito de comparar as cores, é aconselhável
usar um tubo controle (branco) contendo somente água.
Preparação do reagente de Barfoed: dissolva 66,5 g de acetato de cobre II em
800 mL de água, adicione 6,0 mL de ácido acético glacial e complete, com água
destilada, ovolume até 1000 mL.
03 - Teste de Benedict para açúcares redutores:
Faça os testes usando soluções de carboidrato a 1%. Adicione 2,5 mL do
reagente de Benedict e 1 mL da solução de cada carboidrato em diferentes tubos
de ensaio e agite. Coloque os tubos em banho-maria (todos ao mesmo tempo).
Após 5-6 min observe o que aconteceu. Anote qualquer mudança de coloração
(turbidez) ou formação deprecipitado.
Adicione 4-5 gotas de solução de HCl 3M a 5 mL de solução de sacarose e
aqueça em banho-maria por 5 min. Faça o mesmo com uma solução 1% de amido
mas deixe aquecer por cerca de 30 min. Faça o teste de Benedict usando 1-2 mL
das soluções acidificadas (sacarose e amido) e compare os resultados obtidos com
as soluções sem a adição de ácido.
04 - Teste de Bial: distingue pentoses dehexoses.
Transfira 4 mL de cada uma das soluções de carboidrato a 1% para
diferentes tubos de ensaio. A cada um dos tubos adicione 2mL do reagente de Bial
e 5mL de ácido clorídrico concentrado. Agite e coloque os tubos de ensaio em
banho-maria por 10 min. Um teste positivo para pentose é indicado pelo
desenvolvimento de cor verde a azul intenso. Hexoses produzem cor marrom ou
marromesverdeada.
Preparação do reagente de Bial: dissolva 6 g de orcinol em 200 mL de etanol
95% e adicione 40 gotas de solução 10% de FeCl3.6H2O.
05 - Teste de Seliwanoff distingue cetoses de aldoses:
Coloque 2-3 gotas de soluções de carboidratos em diferentes tubos de
ensaio. Adicione 5 mL de solução de resorcinol (dissolva 0,05 g de resorcinol em
100 mL de solução de HCl diluído HCl:H2O, 1:2)....
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