teste de coombs

COOMBS INDIRETO

1.0 OBJETIVO
Pesquisar a presença de anticorpos incompletos ou imunes presentes no soro.

2.0 APLICABILIDADE
Este teste faz parte da rotina de exames no pré-natal de gestantes Rh negativo, triagem de anemias hemolíticas e provas pré- transfusionais. Reações falso-positivas podem decorrer da presença de crioaglutininas.

3.0 DEFINIÇÕES
Coombs indireto è a pesquisa de anticorpos irregulares ou Coombs indireto detectam imunoglobulinas IgG ou frações do complemento ligadas às hemácias, o que pode ocorrer em situações patológicas levando principalmente a hemólise. Este teste faz parte da rotina de exames no pré-natal de gestantes Rh negativo, triagem de anemias hemolíticas e provas pré- transfusionais. Reações falso-positivas podem decorrer da presença de crioaglutininas.

4.0 CONSIDERAÇÕES GERAIS
È um teste muito sensível que revela a presença de quantidades pequenas de anticorpo, nesse caso destinando-se a pesquisa de anticorpos que a mãe desenvolveu para o sangue da criança durante a gravidez.

5.0 MATERIAL UTILIZADO

Tubos de ensaio 75 x 70mm
Soro de Coombs
Micropipeta de 50 microlitros
Solução de salina de 0,85%
Suspensão de glóbulos vermelhos normais O Rh positivos lavados e suspensos a 5% em salina.
Albumina bovina a 20% em salina.

6.0 PROCEDIMENTOS
Separar o soro do sangue antes de completar 24 horas de colhido e colocar 50 microlitros em cada um de dois tubos de ensaio, e numerando-os como 1 e 2.
Acrescentar 50 microlitros de suspensão de hemácias em cada tubo e homogeneizar.
Adicionar 50 microlitros de albumina bovina 20% no tubo 2 e incubar a 37graus por 15 a 20 minutos.
Lavar 3 vezes com salina, desprezando o sobrenadante completamente após a última centrifugação.
Acrescentar 50 microlitros do soro de Coombs sobre os glóbulos vermelhos e misturar.
Esperar cerca de 10 minutos e centrifugar a 1000 rpm por 1 minuto.
Ressuspender, delicadamente, os glóbulos vermelhos observando a hemaglutinação.