tecnicas histologicas

Quase todos os componentes das células e da matriz extracelular são transparentes. Isso não se deve apenas ao seu alto conteúdo de água, pois, mesmo dessecados, continuam tendo um contraste muito baixo. Para vencer esta limitação, são empregados corantes, que coram os componentes celulares com certa especificidade. No entanto, como a maioria dos corantes é tóxica, as células vivas não conseguem resistir a eles. Por este motivo, antes de serem corados, os tecidos são submetidos a um tratamento.
. Fixação – a fixação do material é essencial para preservar a morfologia e a composição química dos tecidos e das células. Consiste na morte destas últimas de um tal modo que as estruturas que possuíam em vida se conservem com um mínimo de artifícios. Os melhores fixadores são, na realidade, misturas fixadoras contendo diferentes substâncias químicas que oferecem ótimos resultados na preservação de estruturas biológicas. Exemplos: soluções de Bouin (formaldeído, ácido acético e ácido pícrico) e Helly conhecida também como Zenker-Formol (formol, bicloreto de mercúrio e dicromato de potássio). Para o microscópio eletrônico, são usadas soluções contendo glutaraldeído e tetróxido de ósmio.
. Desidratação – tem por objetivo a retirada de água do fragmento, causando endurecimento deste e tornando-o adequado às etapas posteriores de inclusão e microtomia. A desidratação para microscópio de luz é feita por imersão do fragmento em uma série de álcoois graduados. Para a microscopia eletrônica, utilizam-se ainda acetona ou óxido de propileno.
. Diafanização – tem por objetivo retirar o álcool do fragmento e torná-lo transparente, preparando-o assim para a microtomia e coloração. São usadas substâncias solúveis em álcool e insolúveis em água (xilol), com densidade maior do que a do álcool.
. Inclusão – consiste em incluir o fragmento em um molde metálico ou plástico contendo o meio de inclusão em estado líquido que, ao se solidificar, forma um bloco contendo o material biológico. Para