Roteiros Aulas Práticas Exames Laboratoriais

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UNIVERSIDADE FEDERAL DE PERNAMBUCO - UFPE
CENTRO ACADÊMICO DE VITÓRIA – CAV
DISCIPLINA: EXAMES LABORATORIAIS APLICADOS À
ENFERMAGEM

ROTEIROS DE AULAS PRÁTICAS DE
EXAMES LABORATORIAIS
(Compilados a partir das bulas dos kits)

Vitória de Santo Antão, 2012

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UNIVERSIDADE FEDERAL DE PERNAMBUCO - CAV
DISCIPLINA DE EXAMES LABORATORIAIS APLICADOS À ENFERMAGEM
Profas. Idjane Oliveira, Isabella Macário e Juliana Melo

Assunto: Dosagem de glicose aleatória (sem jejum)

Roteiro de Aula Prática
DOSAGEM DE GLICOSE
1. Objetivo: Determinar enzimaticamente a dosagem de glicose em amostras de soros.
2. Metodologia: Glicose oxidase (Doles).
3. Princípio: A glicose em contato com a glicose oxidase forma o ácido glucônico e peróxido de hidrogênio. Este em reação com o 4-aminoantipirina na presença da enzima peroxidase forma o composto 4-antipirilquinomina (coloração avermelhada) e água. A quantidade de glicose é proporcional à coloração (formação de 4-antipirilquinomina).
4. Procedimento:




Reconstituir o reagente de uso tampão/ enzimas, conforme bula do kit.
Identificar 3 tubos com as letras B (branco), T(amostra teste) e P(padrão),
Pipetar os volumes e reagentes em cada tubo seguindo a tabela abaixo:

B
Reagente de cor
Solução padrão
Amostra



T
2,0mL
-

P
2,0mL
20uL

2,0mL
20uL
-

Misturar por agitação e incubar os tubos a 37oC por 10 minutos.
Ler as absorvâncias em espectrofotômetro a 510nm ou fotocolorímetro com filtro verde, acertando o zero com o conteúdo do tubo branco. A cor final permanece estável por 20 minutos.

5. Cálculo dos resultados: solução padrão: 100mg/dL
Fator de calibração = Concentração do padrão (100)
Absorvância do padrão
Glicose (mg/dL) = Absorvância da amostra teste X fator de calibração

OBS.: Para cada novo kit aberto deve ser calculado um novo fator de calibração.
6. Valores de Referência
Soro: 70 – 110mg/dl
Líquor: 40-70mg/dl.

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