PARTE EXPERIMENTAL

PARTE EXPERIMENTAL
EXTRAÇÃO
CORTOU EM PEDAÇOS PEQUENOS CINCO OU SEIS FOLHAS DE ESPINAFRE FRESCO (cerca de 5 gramas), colocou em um recipiente (almofariz), adcionou 5ml de acetona e 10 ml de hexano e prensou o material com um pistilo de porcelana durante alguns minutos. Transferiu o liquido resultante para um backer e retiorou a fase acuosa com pipeta de pasteur. Adicionou a fase orgânica (hexano/extrato) uma pequena quantidade de sal de cozinha (uma camada fina no fundo recipiente) para eliminar a agua residual.

MONTAGEM DA COLUNA CROMATOGRAFICA
Utilizou-se uma bureta de volume compatível ou tudo de vidro de 1,8-2cm de diâmetro e cerca de 30cm de coimprimento com um “afilamento” em uma das extremidades, introduziu um chumaço pequeno de algodão e pressionou com uma vareta para fixá-lo. Colocou-se na ponta do “afilamento” da coluna um pedaço de tubo de látex de 5-6cm e improvisou-se uma torneira, com uma pinça. Colocou-se na coluna com a torneira fechada utilizando um funil, o removedor, deixando o volume “morto” (sem solvente) de 6-8cm. Com o funil de boca larga despejou-se sobre o hexano, de forma continua, 15-18g de açúcar comum refinado “grumos”. Após a adicição de todo o açúcar, para melhorar o empacotamento, bateu-se suavemente na coluna com um pedaço de mangueira para gás. Antes de realizar a próxima etapa separou e enoumerou 10 frascos (Becker erleymeyer) ou tudo de ensaio de 8ml limpos e secos.

APLICAÇÃO DA AMOSTRA
Depois do empacontamento da coluna, escoou-se o enloente até 3-5mm acima da superfície de sacarose com a torneira fechada aplicando a solução de extrato/hexano no topo da coluna com pipeta de pasteur deixou-se a solução escorrer lentamente pela parede do tubo de vidro. Após a aplicação da solução, escoou-se o solvemte para um frasco de erleymeyer até o nível da solução ficando 3-5mm acima da superfície de açúcar comum. Adicionou com pipeta de pasteur cerca de 5ml de eluente (hexano), repetindo-se a operação anterior.
Antes da solução de outros