MICROBIOLOGIA
COLORAÇÃO DE GRAM
Introdução
A coloração de Gram é um método de coloração de bactérias desenvolvido pelo médico dinamarquês Hans Christian Joachim Gram (1853 - 1838), em 1884. Essa técnica permite a separação de amostras bacterianas em Gram-positivas e Gram-negativas, sendo importante na caracterização de bactérias Esta diferenciação baseia-se na estrutura e composição, no diferente teor lipídico, da parede celular de bactéria.
Objetivo
Avaliar a morfologia da bactéria pelo método de separação em Gram, que é importante nos exames microbianos, no diagnostico de infecções.
Materiais
• Lamina;
• Solução salina;
• Cabo de Colle;
• Bico de Bunsen;
• Colônia de bactérias;
• Cristal Violeta, Lugol, Álcool-acetona, Fucsina;
• Microscópico
• Óleo de imersão
Métodos
Colocou-se as luvas.Sobre a lâmina de vidro, colocou-se uma gota de solução salina. Usou-se a técnica asséptica, colocando o bico de busen entre a pessoa que esta estudando e o objeto a ser estudado, com a intenção de não transmitir micro-organismo para ambos. Pegou-se uma colônia com o cabo e colocou-se na lamina junto à solução salina. Igualou-se e esperou secar. Passou por três vezes no bico de busen com o objetivo de fixar o material. Depois, cobriu-se o esfregaço com cristal violeta e deixamos agir por um minuto. Lavou-se o esfregaço com água corrente removendo o excesso. Cobriu-se o esfregaço com lugol por um minuto e lavamos novamente com água corrente. Esgota-se a lâmina e, mantendo a mesma inclinada, pingaram-se gotas de Álcool-acetona até que não se desprenda mais corante. Lavou-se com água corrente. Cobriu-se a lâmina com solução de fucsina por trinta segundos. Lavou-se a lâmina e deixou secar. Passado alguns dias, pegamos a lamina e fomos ate o laboratório examinar. Observou-se bactérias na objetiva de 10x e depois na de