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UNIVERSIDADE ESTADUAL DE CAMPINAS - UNICAMP
CENTRO SUPERIOR DE EDUCAÇÃO TECNOLÓGICA – CESET
DIVISÃO TECNOLÓGICA DE SANEAMENTO – DTS
BIOLOGIA APLICADA II - ST 207

Roteiro de aula práticaDeterminação de coliformes totais PELO TESTE CROMOGÊNICO - COLILERT

1. INTRODUÇÃO

O sistema reagente do teste apresenta uma formulação específica que otimiza o desenvolvimento rápido dosmicrorganismos. Esta formulação é específica para o desenvolvimento de coliformes e da bactéria E coli em águas doce e tratada.
Os microrganismos têm afinidade por determinados nutrientes correspondentes aoseu metabolismo e utilizam estes nutrientes como fonte de carbono. Os nutrientes indicadores específicos de Colilert são:
- ONPG: orto-nitrofenol-(-galactopiranoside
- MUG:4-metil-umbeliferil-(-d-glucurônico
As bactérias coliformes possuem a enzima (-galactosidade, à medida que estas se reproduzem no Colilert, utilizam a enzima para metabolizar o ONPG, alterando sua cor de incolorpara amarelo.
As bactérias E.coli possuem a enzima (-glucuronidade que metaboliza o MUG, caso esteja presente no Colilert, originando fluorescência.
Já que a maioria dos microrganismos nãocoliformes não conta com estas enzimas, eles não podem se reproduzir e interferir.
O Colilert utiliza tecnologia de substrato definido (Defined Substrate Technoligy – DST) e detecta um únicocoliforme ou E coli viável por amostra.

2. PROCEDIMENTO

a) Identificar a amostra a ser analisada.
b) Adicionar o reagente do flaconete ao frasco contendo 100 mL de amostra,feche-o e agite paratotal mistura.
c) Despeje todo o conteúdo do frasco na cartela.
d) Coloque a cartela na seladora para que esta seja lacrada.
e) Transfira a cartela para a incubadora a 35oC, Durante 24horas.

3. RESULTADOS

Para a interpretação dos resultados:
- Cavidades Incolores: resultado negativo
- Cavidades Amarelas: coliformes totais
- Cavidades Amarelas/fluorescentes: E...
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