Introdu O Bioquimica

310 palavras 2 páginas
Introdução
A Eletroforese é uma técnica de separação e purificação de moléculas, como material genético e proteínas, de diferentes tamanhos e conformações. A separação dá-se através da migração das moléculas, para os polos positivo ou negativo, de um campo elétrico aplicado, sendo que para tal as moléculas devem apresentar uma determinada carga.
A SDS-PAGE, eletroforese unidimensional, consiste em um método para a separação de polipeptídios de acordo com os seus pesos moleculares. A técnica é realizada em gel de poliacrilamida contendo duodecil sulfato de sódio (SDS), molécula anfifílica usada como desnaturante, ou seja, um detergente que liga-se as cadeias polipeptídicas através de interações hidrofóbicas, proporcionando as macromoléculas uma carga líquida negativa e formas estruturais semelhantes.
Para a visualização das proteínas após o processo de eletroforese, é necessário mergulhar-se a placa de gel em um corante, exemplo o azul Coomassie que irá ligar-se somente as proteínas permitindo a verificação da formação de inúmeras bandas proteicas.
No experimento realizado, foram analisadas através da eletroforese e identificadas por diferenças quanto ao perfil proteico, considerando que em uma célula é possível encontrar vários tipos de proteínas, duas linhagens distintas de Xanthomonas, bactérias responsáveis pelo cancro cítrico, doença que afeta plantas cítricas, como limão, laranja, lima e outros. As linhagens analisadas foram a Xanthomonas citri subsp. citri (XAC), causadora da cancrose A, de alta virulência, afetando citros em geral, e a xanthomonas fuscans subsp. Aurantifolii (XAU C), causadora da cancrose C, de menor virulência, hospedando-se geralmente em lima acida galego .Ambos os fitopatogénos foram cultivados em meio XAM-1, conhecido como um meio indutor de patogenicidade.

Objetivo:
O objetivo do experimento foi separar proteínas totais e analisar os perfis proteicos de duas linhagens diferentes da bactéria Xanthomonas, XAC e XAU-C, nas mesmas

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