Fusão do gelo

1. OBJETIVO:

Aprender a aplicar a técnica de coloração de Gram, classificar as bactérias em Gram-positivas ou Gram-negativas, observar a morfologia e arranjos bacterianos, ver a importância da realização da coloração de Gram e descrever a relação entre a composição química da parede celular e o resultado da coloração de Gram.

2. INTRODUÇÃO:

Método de coloração de bactérias desenvolvido pelo médico dinamarquês Hans Christian Joachim Gram, em 1884, e que consiste no tratamento sucessivo de um esfregaço bacteriano, fixado pelo calor, com os reagentes cristais violeta, lugol, etanol-acetona e fucsina básica. Essa técnica permite a separação de amostras bacterianas em Gram-positivas e Gram-negativas baseando-se na composição da parede bacteriana, e permitindo determinar a morfologia e o tamanho das bactérias analisadas.

O método da coloração de Gram é baseado na capacidade das paredes celulares de bactérias Gram-positivas de reterem o corante cristal violeta durante um tratamento com o etanol-acetona enquanto que as paredes celulares de bactérias Gram-negativas não o fazem. Isso só acontece devido à diferença entre os dois tipos de paredes celulares das bactérias.
Gram Positivas- A camada de peptideoglicano é mais espessa e algumas também possuem uma camada de ácido teicóico externa à camada de peptídeoglicano.

Figura 1- Parede celular de uma bactéria Gram-Positiva.

Gram Negativas- membrana externa composta por lipossacarídeos (LPS), lipopoliproteínas e fosfolipídios. Há o espaço periplasmático- entre membrana citoplasmática e camada de peptídeoglicano- que em alguma espécie contem B – lactamases (degrada penicilina) e B- lactâmicas.

Figura 2- Parede celular de uma bactérias Gram-Negativa.

A coloração de Gram é um dos mais importantes métodos de coloração utilizados em laboratórios de microbiologia, sendo quase sempre o primeiro passo para a caracterização de amostras de bactérias. A técnica tem importância clínica uma vez que muitas das