Estudante

Centro de Formação Profissional Américo Renê Giannetti
CURSO TÉCNICO DE BIOTECNOLOGIA

TESTE ELISA
(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay)
EnzymeAssay

Alunos: Gabriel Carmo, Isabela Rodrigues e Tayná Santos
Instrutor: Carlos Alberto
Disciplina: Imunologia

Introdução
Métodos imunológicos
Quantificar a concentração de antígenos e anticorpos; Sensibilidade e especificidade;
Pesquisa e aplicações clínicas.
Diagnóstico de doenças.

Imagens: testes em laboratório

Introdução
ELISA
Ensaio de Imunoabsorção Ligado a Enzima;
Identificação de anticorpos e antígenos;
Alta sensibilidade;
Método qualitativo e quantitativo;

Imagem: teste ELISA

Introdução
Princípio Básico

Imagem: teste ELISA

Introdução
Principais tipos:
Indireto;
Direto (ou Sanduíche);
Competição;
Captura.

Elementos Utilizados
Fase solida
Poliestileno.
Amostra
Soro ou plasma.
Bloqueio
Caseína, albumina.

Diluente da amostra
Twen20.
Solução lavagem salina tamponada com fosfatos .
Conjugado

Elementos Utilizados
Substratos
H2O2
Cromogênio
Orto-fenilenodina.
Antígeno purificado

Anticorpos
Espectofotômetro
Controles negativo e positivo Padrões

Tipos de Elisa
Teste indireto
Adiciona-se o Ag na placa

Adição do conjugado Lavagem

Ag adere na superfície da placa Lavagem

Adição do cromogênio e substrato Lavagem

Adiciona-se a amostra Leitura por espectrofotômetro Teste Indireto

Imagem: etapas do teste indireto de elisa

Tipos de Elisa
Teste Direto ou Sanduiche
Adiciona-se o Ac conhecido na placa Adição do conjugado Lavagem

Ac adere na superfície da placa Lavagem

Adição do cromogênio e substrato Lavagem

Adiciona-se a amostra Leitura por espectrofotômetro Teste Direto

Imagem: etapas do teste direto de elisa

Elisa por Competição
Adição de anticorpos
Adição de anticorpos específicos aos poços da placa específicos aos poços da placa

Intensidade da
cor