Espectrofotometria

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Relatório do trabalho prático:
Comparação entre a quantificação de diazepam por Espectrofotometria e HPLC













Índice


Introdução........................................................................................................................3Objetivos...........................................................................................................................6

Materiais e Métodos........................................................................................................7

Resultados......................................................................................................................10

Discussão.......................................................................................................................18

Conclusão.......................................................................................................................20

Referências Bibliográficas...............................................................................................21









Introdução

Este trabalho prático teve como actividade o doseamento do diazepam (C16H13ClN2O)(1),pertencente ao grupo dos psicofármacos, mais concretamente nos a HYPERLINK "http://www.infarmed.pt/prontuario/framenavegaarvore.php?id=49"nsiolíticos, sedativos e hipnóticos / b HYPERLINK "http://www.infarmed.pt/prontuario/framenavegaarvore.php?id=52"enzodiazepinas, que tem como principal objetivo o tratamento de síndromes de ansiedade, estados de tensão no pré-cirurgico e no controlo de espasmosmuscular.(2) Este doseamento pode ser realizado por vários métodos analíticos, no entanto, para este trabalho prático usamos dois métodos, a Espectrofotometria de Absorção Molecular UV/Vis e a Cromatografia Líquida de Elevada Pressão (HPLC).
A Espectrofotometria de Absorção Molecular UV/Vis consiste na absorção de energia radiante de soluções contendo grupos absorventes nos seus compostos. Estemétodo utiliza a radiação eletromagnética cujos comprimentos de onda () variam entre 200 a 780 nm. A molécula do composto poderá sofrer transições electrónicas aquando da absorção da energia quantizada, quando é estimulada por este tipo de radiação.
Em termos práticos, um dos aspetos mais relevantes para calcular a concentração da substância em solução é a determinação da quantidade de luz queé absorvida pela amostra, que é descrito pela Lei de Beer-Lambert, relacionando a intensidade da luz incidindo na solução (I0), e a intensidade da luz saindo da solução (I). Esta lei assenta numa equação: (3)

Log (I0/ I) = A= x C x l
A = absorvância;
= absorvidade molecular ou coeficiente de extinção;
C = concentração da substância dissolvida;
l = espessura da amostra da amostraatravés da qual a luz passa.

Para a determinação da substância, é preciso conhecer-se os valores de e l, que são adquiridos através de uma curva que relaciona A com C, a chamada curva de calibração, que é utilizada quando a concentração esperada não é conhecida. Neste caso a concentração da amostra é obtida pelo método da interpolação. Contudo, quando a é conhecido o valor da concentraçao esperadaobtemos a concentração da amostra, por extrapolação, lendo-se a absorvância de um padrão de concentração rigorosa e igual à que se espera ter na amostra. Para a realização do trabalho prático foi adoptado o método da interpolação para a determinação da concentração da substância (diazepam) na solução-problema por espectrofotometria UV/Vis.
O comprimento de onda, no qual se procedem às leiturasda absorvância, deverá ser o correspondente ao máximo de absorvância e ao mínimo de interferências. Para a sua selecção é necessário determinar o espectro de absorção (registro gráfico da resposta do sistema ao estímulo).
Os instrumentos capazes de registar os dados de absorvância em função do comprimento de onda são os espectrofotómetros. Um dos aspectos mais importantes destes aparelhos está...
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