Coloração de Gram

Universidade Estadual da Paraíba – UEPB
Aluna: Layse Brito
Curso: Farmácia
Turma: 2011.2

Introdução O nome coloração de Gram deve-se ao criador, Hans Christian Joachim Gram, um médico dinamarquês com especialidade em bacteriologia que desenvolveu a técnica que permite diferenciar as bactérias a partir da coloração que assumem após o processo que posteriormente será explanado.

Objetivo: aprender na prática o processo de coloração de Gram, que é uma técnica de coloração para diferenciação de bactérias através das cores e depois serem observados em microscópio óptico.
Materiais: 01 lâmina, 01 conta gotas, 01 alça de platina, 01 bico de Bunsen, 01 suporte, corantes cristal violeta e fucsina, lugol, descolorante e microscópio óptico.
Métodos: Colocou na lâmina uma gota d’agua com o conta gotas, fez o esfregaço na lâmina com a alça de platina a partir de um meio de cultura bacteriana, esperou secar, para fixar passou 3 vezes na chama do bico de Bunsen com velocidade moderada, colocou no suporte para que fosse colocado o corante cristal violeta por 1 min., depois colocou lugol por 1 min., desprezou, lavou a lâmina, colocou descolorante, lavou a lâmina, levou-se ao suporte para colocar a fuscina por 30 seg., desprezou, lavou, secou com um papel tanto a parte de baixo como a de cima da lâmina e foi levada ao microscópio.
Resultado e discussão: Após todo o processo de coloração e depois de ter focalizado nas objetivas de 4x, 10x, 40x e na de 100x (com óleo de imersão) foi observado que as bactérias da minha lâmina ficaram roxas ao invés de vermelhas, isso se deu pelo fato que não lavei devidamente a lâmina ficando com excesso de corante, mas nada que impedisse a visualização das estruturas das bactérias gram negativas que no processo de coloração o lipídio da membrana mais externa foi dissolvido pelo álcool e liberou o primeiro corante: cristal