Análise de proteínas

Trabalho sobre análise de proteínas realizadas por seguintes métodos:

Método de Biureto
Método de Fenol
Método de Espectrofotometria ultravioleta
Método de Turbidimetria

Método de Biureto
O método de biureto baseia-se na reação do biureto, que é constituído de um mistura de hidróxido de sódio com um complexante que estabiliza o cobre em solução. Ele é aplicado para determinar a concentração de proteínas totais em diversos meios, sendo eles: soro ou plasma sanguíneo, líquido cérebro espinhal, urina alimentos, saliva, fibrinogênio e tecido animal. Também se utiliza este método em análise por injeção em fluxo assim como, em alguns métodos cinéticos. Algumas vantagens deste método é que bastante específico, rápido, simples e utilizam-se reagentes de baixo custo. Porém se tem como desvantagem desse método, de não ser muito sensível, a cor formada no complexo não é idêntica para todas as proteínas e ele está sujeito à interferência de substancias que possam reagir com os íons cobre.
Método de Fenol
O método de fenol consiste na interação das proteínas com o reagente fenol e cobre em condições alcalinas. Neste método ocorre a redução dos constituintes ativos do reagente folin-fenol por meio das cadeias laterais de alguns aminoácidos que contribuem com quatro elétrons ou pela retirada de dois elétrons de cada unidade tetra peptídica dos peptídeos e proteínas, que é facilitada pela formação do quelato entre o cobre e proteínas. Após a reação acima ocorrer, as solução desenvolve uma cor que envolve uma oxidação, catalisada por cobre, de aminoácidos aromáticos por um reagente heteropolifosfato, desenvolvendo uma cor azul, que será medida num colorímetro e comparada com uma curva padrão. As vantagens deste método é que é de 10 á vinte 20 mais sensíveis que a determinação por UV, e 100 vezes mais sensível que o método por biureto e é um método bastante especifico e muito sensivel. As desvantagens é de ser um método lento, pode destruir a