Relatório de extração de DNA plasmidial

I - INTRODUÇÃO

Os plasmídeos são porções de DNA extracromossomal encontrados em bactérias. Esses trechos de material genético possuem informações que, originalmente, não existiam nesses seres procariotos, sendo úteis para a sobrevivência em diferentes situações. A transferência horizontal gênica (THG) é a troca de material genético entre células ou genomas de espécies não relacionadas, ocorrendo em procariotos através da conjugação, transdução e, principalmente, a transformação (Brown, 2003). Os impactos da THG na evolução dos procariotos só foram bem estabelecidos recentemente por meio do sequenciamento completo de genomas bacterianos e através de experimentos em laboratório com organismos modelos. Genomas bacterianos estão em um estado constante de fluxo gênico, sendo que qualquer segmento de DNA em uma população bacteriana pode ser horizontalmente transferido. Porém, apenas uma pequena porcentagem do DNA adquirido será mantido na célula receptora e, então, transferido para gerações subseqüentes, pois muitos mecanismos limitam as aquisições horizontais de genes. Entre esses mecanismos, encontram-se modulações fisiológicas, ambientais e genéticas (Arber, 2000; Solomon & Grossman, 1996), como a repressão catabólica do óperon Lac. Ademais, os plasmídeos possuem funções úteis aos seres humanos, já que são uma forma de se inserir informação genética interessante para a produção de substâncias, por exemplo, a insulina e o hormônio de crescimento. Com a proposta de extrair o conteúdo plasmidial de uma cultura de bactérias de Escherichia coli, o seguinte artigo tenta demonstrar que com o uso de soluções contendo EDTA (agente quelante), NAOH, SDS (detergente aniônico responsável pela abertura de pequenos poros que permitem a passagem dos plasmídeos, mas não do DNA cromossomal), Agentes tamponantes, etanol, temperaturas adequadas e também maquinaria apropriada, como centrífugas, pipetas é possível conseguir resultados confiáveis e interpretáveis do ponto de vista