MODELO POP
Princípio
O ácido úrico é oxidado pela uricase à alantoína e peróxido de hidrogênio. O peróxido de hidrogênio na presença da peroxidase reage com o DHBS e a 4-aminoantipirina, formando o cromogênio antipirilquinonimina. A intensidade da cor vermelha formada é diretamente proporcional à concentração do ácido úrico na amostra.
Reagentes
Reagente 1 - Armazenar entre 2 - 8 °C.
Reagente 2 - Armazenar entre 2 - 8 °C.
Padrão – 6,0 mg/dL - Armazenar entre 2 - 8 °C.
Os reagentes 1 e 2 contém azida sódica.
Precauções, cuidados especiais e interferências:
Ver Instruções de Uso.
Amostra
Usar soro, urina e líquidos (amniótico e sinovial). O analito é estável 3 dias entre 2 - 8 °C e 6 meses a 10 °C negativos.
Preparo do Reagente de Trabalho
Transferir o conteúdo de um frasco do Reagente 2 para um frasco do Reagente 1 e homogeneizar suavemente. Anotar a data de expiração.
Estável 5 dias entre 15 – 25 °C e 90 dias entre 2 – 8 °C. Identificar o frasco do Reagente de Trabalho.
Opcionalmente pode-se preparar menor volume do Reagente de Trabalho utilizando a proporção de
4,0 mL do Reagente 1 para 1,0 mL do Reagente 2.
Metodologia e Reação
Metodologia: Enzimático Trinder
Reação de Ponto Final
Procedimento
Urina: homogeneizar a urina, separar 10 mL, acertar o pH entre 7,0 e 9,0 com NaOH 5% e aquecer
10 minutos a 56 °C para dissolver os cristais de urato e ácido úrico. Diluir a urina 1:10 (0,1 mL de urina + 0,9 mL de água destilada). Multiplicar o resultado obtido por 10 (dez).
Tomar 3 tubos de ensaio e proceder como a seguir:
Branco
Teste
Padrão
Amostra
--0,02 mL
--Padrão (nº3)
----0,02 ml
Reagente de Trabalho
1,0 mL
1,0 mL
1,0 mL
Misturar e colocar em banho-maria a 37 °C durante 10 minutos. O nível da água no banho deve ser superior ao nível do reagente nos tubos de ensaio. Determinar as absorbâncias do teste e padrão em
520 nm ou filtro verde (490-540) acertando o zero com o branco. A cor é estável por 15