indol
O objetivo é determinar a capacidade do microrganismo degradar o aminoácido triptofano (presente em quase todas asproteínas) até indol.
O triptofano é um aminoácido essencial que pode sofrer oxidação pelas atividades enzimáticas de algumas bactérias. A conversão do triptofano em produtos metabólicos é mediada pela enzima triptofanase.
Como a capacidade de hidrolisar o triptofano com produção de indol (não é utilizado e acumula-se no meio) não é uma característica de todos os microrganismos serve como marcador bioquímico. Há microrganismos que não metabolizam o triptofano ou então fazem metabolização completa desse aminoácido sem produzir indol.
Utiliza-se um meio de cultura que contenha o aminoácido triptofano por ex.: água peptonada. Após o crescimento pesquisa-se a presença de indol adicionando o reagente de Kovac’s (cor amarelo) ao longo das paredes do tubo, de modo que não se misture com o meio de cultura. Este reagente reage com o indol produzindo um composto rosado.
As culturas que produzem um anel avermelhado na superfície do meio após adição do reagente são indol positivo. A persistência da coloração amarela do reagente demonstra que o substrato triptofano não foi hidrolisado a indol e indica uma reação negativa.
Meio de Indol
Princípio
É utilizado para diferenciar gêneros e espécies de enterobactérias.
Determina a habilidade do microrganismo de metabolizar o triptofano em indol. Triptofano é um aminoácido que pode ser oxidado por certas bactérias resultando na produção de indol, após a adição de reagentes de Erlich ou Kovacs.
Fórmula
Triptona
1 g
Água destilada
100 mL
Preparo
Pesar e colocar em balão já contendo a metade da água, homogeneizar e acrescentar o restante da água, agitar até completa dissolução. Em seguida distribuir 2 mL em tubos 12 mm x 75 mm, fechar cada tubo com rolha de algodão hidrófobo, autoclavar a 120° C por 15 minutos.
Conservação e Qualidade
Conservar embalado de 4 a