Hidrólise ácida do amido

CARACTERIZAÇÃO DE CARBOIDRATOS

HIDRÓLISE ÁCIDA DO AMIDO

Por aquecimento de uma solução de amido em presença de HCl, ocorre hidrólise das ligações glicosídicas. Em função do tempo de hidrólise são encontrados como produtos intermediários dextrinas e oligossacarídeos, sendo o produto final da hidrólise ácida, a glicose. As dextrinas, dependendo do seu tamanho e complexidade molecular, desenvolvem diferentes colorações com o iodo. A reação de hidrólise do amido pode ser acompanhada pela reação com o DNS ou outros reagentes para identificação e dosagem dos açúcares redutores, que são produzidos na hidrólise.
Objetivos
Demonstrar que um polissacarídeo pode ser hidrolisado com a produção de açúcares redutores.
Verificar, através de reações específicas, o desaparecimento do amido e o concomitante aparecimento de açúcares redutores durante o curso da hidrólise

Material Necessário Erlenmeyer de 125 mL; Tubos de ensaio e estante para tubos de ensaio; Micropipeta e Pipeta; Banho-Maria.
Reagentes
Solução de Amido 1% (m/v);
Solução de Lugol (iodo-iodeto de potássio);
Solução de Ácido 3,5 – Dinitrosalicílico (DNS);
Solução de Hidróxido de sódio 50%;
Ácido Clorídrico concentrado.

Procedimentos
1. Prepare 2 conjuntos de 6 tubos de ensaio, numerando-os de 1 a 6;
2. Adicionar duas gotas de lugol nos seis tubos do primeiro conjunto;
3. Transferir 1 mL do reagente DNS para cada tubo do segundo conjunto, mais 100 µL da solução de NaOH 50%;
4. Adicionar 0,5 mL de água destilada, nos tubos de ensaio número 1 de cada conjunto.
5. Em cada Ernlenmeyer contendo 100 mL da solução de amido 0,5% e 1% adicionar 4mL de HCl concentrado;
6. Misturar e retirar imediatamente uma alíquota de 0,5 mL para o tubo 2 de cada conjunto;
7. Levar o Erlenmeyer ao banho-maria em ebulição;
8. A cada 10 minutos, retirar uma alíquota de 0,5 mL para os tubos de cada conjunto conforme o quadro 1;
9. Colocar os cinco tubos contendo o hidrolisado contendo o reativo DNS