Fatores que interferem na qualidade do dna extraído de amostras biológicas armazenadas em blocos de parafina
6218 palavras
25 páginas
J Bras Patol Med Lab • v. 47 • n. 5 • p. 541-548 • outubro 2011artigo de reVisão review article
Fatores que interferem na qualidade do DNA extraído de amostras biológicas armazenadas em blocos de parafina
Factors that affect the quality of DNA extracted from biological samples stored in paraffin blocks
Primeira submissão em 19/01/11 Última submissão em 20/07/11 Aceito para publicação em 26/07/11 Publicado em 20/10/11
Anderson Paulo Scorsato1; José Ederaldo Queiroz Telles2
unitermos
Tecido Parafina DNA Formol Qualidade
resumo
Os avanços tecnológicos e metodológicos da biologia molecular criaram a possibilidade de obter DNA de amostras teciduais estocadas em blocos de parafina, alternativa esta que permite estudos retrospectivos de grandes bancos de tecidos contendo inúmeras doenças raras. O objetivo deste trabalho foi a realização de uma breve revisão de alguns fatores inerentes à qualidade do produto extraído proveniente de blocos de parafina armazenados. Os processos envolvidos nas fases de prefixação, fixação, pós-fixação apresentam aspectos que são causa de resultados de produtos finais insatisfatórios. Na fase de prefixação, alterações bioquímicas influenciam na preservação das macromoléculas. As mudanças moleculares causadas pelos fixadores para evitar autólise celular podem ser um limitante no momento da extração de DNA. A qualidade do DNA obtido nas duas primeiras fases é considerada importante para os procedimentos de pós-fixação (extração e purificação do DNA). Existem na literatura vários protocolos, com diferentes passos que podem ser modificados, para a obtenção de DNA de material parafinado. Assim, a compreensão das reações em cada fase é importante para solucionar ou minimizar problemas, que influenciam na qualidade das macromoléculas de DNA.
abstract
Technological and methodological advances in molecular biology have enabled the obtainment of DNA from paraffin embedded tissue, thus allowing the use of extensive pathological