O uso de células dendríticas

Artigo: Virus-induced Gene Silencing (VIGS) in Nicotiana benthamiana and Tomato
Autores: André C. Velásquez, Suma Chakravarthy, and Gregory B. Martin
LINK: (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC2795700/?report=classic)
A transfecção viral foi realizada em plantas.
Foi utilizado plasmídeo TI de Agrobacterium tumefaciens, bactéria patogênica para plantas.
Foram utilizadas duas cepas diferentes da bactéria, uma carregando o plasmídeo pTRV 1 que codifica funções de replicação e movimento viral e outra pTRV2 que codifica a capa protéica e as sequencias utilizadas para o silenciamento gênico induzido por vírus (VIGS).
Foi silenciado o gene PDS (phytoene desaturase) endógeno, este foi utilizado como controle da eficiência do VIGS. (resultado: fotodegradação- fotobranqueamento)
O vetor utilizado foi o vírus TRV (tobacco rattle virus) vírus patogênico para planta e bipartido.
As plantas silenciadas para PDS apresentaram características fenotípicas de fotobranqueamento, observado com uma semana e meia após a infiltração. Afirmou-se que o silenciamento em Nicotiana benthamiana foi mais eficiente do que em Tomate. Sendo importante a escolha do estágio de desenvolvimento da planta e a manutenção de condições adequadas para o desenvolvimento da mesma para a disseminação viral.
OBS: Na metodologia tem os reagentes e concentrações, mas não esclarece a função de cada um.
Contato: [e-mail]
Technical Advance: Tobacco rattle virus as a vector for analysis of gene function by silencing
Ratcliff F1, Martin-Hernandez AM, HYPERLINK "http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=Baulcombe%20DC%5BAuthor%5D&cauthor=true&cauthor_uid=11169199" Baulcombe DC.
Vantagens do uso de TRV como VIGS:
O silenciamento de genes induzido por TRV afeta uma percentagem mais elevada de tecido
É mais persistente, pelo menos para alguns genes, pode provocar uma maior redução no acúmulo de RNAmÉ capaz de penetrar no pontos de crescimento da planta, a maioria dos