Titulo

PRODUTOS FLORESTAIS NÃO-MADEIREIROS
PROF. Fábio Akira Mori

Obtenção dos extrativos polifenólicos:
- Utilização de solventes
Metanol-água
Acetona-água

Determinação de fenóis-totais:
a) Método do Azul-da-Prússia (modificado)
0,10 mL de extrato bruto, 1mL de K3Fe(CN)6 0,0016M e 1,0 mL de FeCl3 em HCL 0,1N. Agitar durante 15 minutos à temperatura ambiente. Adicionar 3,0 mL de solução de ácido fosfórico 85% e deixar em repouso por 2 minutos. Acrescentar 2,0 mL de goma arábica a 1% e registrar a abasorvância da solução a 700 nm. Proceder de forma semelhante com as soluções padrões (1-50 µg/mL).
b) Método Folin-Ciocalteau
0,10 mL de extrato bruto, diluir em água destilada para 50,0 mL. Retirar uma alíquota de 0,5 mL. Adicionar à alíquota 2,5 mL de solução aquosa do reagente de Folin-Ciocalteau a 10% e 2,0 mL de carbonato de sódio a 7,5%. A mistura será mantida por 5 minutos em banho-maria, a 50 °C e registrar a absorvância a 760 nm. Proceder de forma semelhante com as soluções-padrão (1-50 µg/mL) e com o branco

c) Método de Folin-Denis (1970). Pesar duas amostras de 2 g de extrato bruto. Cada amostra serái colocada em um erlenmeyer, adicionando-se 100 mL de metanol (80%) e levar à chapa aquecedora, contado-se 15 minutos após fervura. O material será filtrado em papel de filtro Whatmanm no 12. O resíduo retido no filtro retornará ao erlenmeyer, adicionando-se novamente 100 mL de metanol (80%), e levar novamente à chapa aquecedora por mais 15 minutos. Este procedimento será repetido mais duas vezes, finalizando 3 fervuras e 3 filtragens, cujo filtrado final será de aproximadamente 300 mL. O filtrado final será levado à chapa aquecedora e seco até ± 5 mL completando-se o volume com água destilada para 500 mL. Deste material retirar 1 mL que será diluído em 2 mL de água destilada. Desta diluição final retirar amostras de 0,1 mL e este ser adicionado em tubo de ensaio com 8,4 mL de água destilada, 0,5 mL de reagente Folin-Denis e 1 mL de carbonato de