Tecnologia da Biologia Celular e Molecular

Tecnologia da Biologia
Celular e Molecular

Os conhecimentos sobre as células progridem paralelamente ao aperfeiçoamento dos métodos de investigação. O aparecimento de numerosas técnicas de uso comum e os diversos ramos da pesquisa biológica levaram ao surgimento do que se costuma chamar de biologia celular e molecular, que é o estudo integrado das células, através de todo o arsenal técnico disponível.
Neste material serão incluídos apenas algumas técnicas que têm contribuído para o progresso da biologia celular e molecular.

O MICROSCÓPIO ÓPTICO OU
MICROSCÓPIO DE LUZ
Limite de resolução e poder de resolução
Limite de resolução: é a menor distância entre dois pontos que permite distinguí-los separadamente. Poder de resolução: é a capacidade de fornecer imagens nítidas. Quanto menor o LR melhor poder de resolução.

Fórmula para o cálculo do LR

LR = K./AN
AN = n.sen 

LR = limite de resolução
K = constante experimental estimada em 0,61
 = comprimento de onda da radiação n = índice de refração do meio
 = ângulo formado pelo eixo óptico da lente objetiva e o raio de luz mais externo utilizado na formação da imagem. Comprimento de onda da luz varia de 400 – 700 nm.
Comprimento de onda do elétron é de 0,005 nm.

Aspectos comparativos do LR
Dica:
relação entre as unidades apresentadas abaixo:
1 mm = 1000 m (micrômetro); 1 m = 1000 nm
(nanômetro); 1 nm = 10 A (angstrom)

Olho humano
Microscópio de luz

0,2 mm
200 nm (0,2 m)

MEV
MET

10 A (1 nm)
Ao redor de 1 – 2 A (0,1 – 0,2 nm).

TIPOS DE MICROSCOPIA
MICROSCOPIA ÓPTICA (MO):
• Campo claro;
• Campo escuro;
• Contraste de fase;
• Contraste interferencial;
• Polarização;
• Fluorescência;
• Microscópio invertido;
• Microscópio estereoscópico;
• Confocal a laser.

MICROSCOPIA ELETRÔNICA (ME):
• de varredura (MEV)
• de transmissão (MET)

MEV
MET

MO

Formação de imagens ao MO
A imagem final será virtual, maior e
invertida