Técnicas de coloração de Gram

1. INTRODUÇÃO

A coloração de Gram é um método de coloração de bactérias desenvolvido pelo médico dinamarquês Hans Christian Joachim Gram (1853 - 1838), em 1884, e que consiste no tratamento sucessivo de um esfregaço bacteriano, fixado pelo calor, com o reagente cristal violeta, lugol, álcool-acetona e funciona fenicana. Essa técnica permite a separação de amostras bacterianas em Gram-positivas e Gram-negativas e a determinação da morfologia e do tamanho das amostras analisadas. A coloração de Gram é um dos mais importantes métodos de coloração utilizados em laboratórios de microbiologia e de análises clínicas, sendo quase sempre o primeiro passo para a caracterização de amostras de bactérias. A técnica tem importância clínica uma vez que muitas das bactérias associadas a infecções são prontamente observadas e caracterizadas como Gram-positivas ou Gram-negativas em esfregaços de pus ou de fluidos orgânicos. Essa informação permite ao clínico monitorar a infecção até que dados de cultura estejam disponíveis. É possível a análise de vários esfregaços por lâmina, o que facilita a comparação de espécimes clínicos. As lâminas podem ser montadas de forma permanente e preservadas como documentação (JUNIOR, 1996).

2. OBJETIVOS

2.1 OBJETIVO GERAL
Determinar e interpretar o mecanismo de reação de Gram, como um método de coloração de diferencial; Discutir as várias etapas da metodologia de Gram, com base na execução de exercícios de coloração.

2.2 OBJETIVOS ESPECÍFICOS

Desenvolver habilidades para executar as técnicas de preparação de esfregaços e para o método de coloração de Gram, sabendo diferenciar e classificar as bactérias de acordo com a coloração obtida;
Adquirir habilidade, também para utilizar o microscópio óptico, observando as bactérias após a coloração de Gram.

3. MATERIAIS E METODOS

3.1 MATERIAIS

Culturas bacterianas

Reagentes:

Cristal violeta
Lugol
Álcool acetona
Fucsina fenicada

Equipamentos:

Microscópio óptico
Bico