Seleção de bactérias associadas a plantas de canade-açúcar com caracteríticas envolvidas na promoção de crescimento vegetal

Páginas: 6 (1423 palavras) Publicado: 7 de abril de 2013
X JORNADA DE ENSINO, PESQUISA E EXTENSÃO – JEPEX 2010 – UFRPE: Recife, 18 a 22 de outubro.

SELEÇÃO DE BACTÉRIAS ASSOCIADAS A PLANTAS DE CANADE-AÇÚCAR COM CARACTERÍTICAS ENVOLVIDAS NA PROMOÇÃO DE CRESCIMENTO VEGETAL
Andreza Raquel Barbosa de Farias1, Luana Lira Cadete1, Marisângela Viana Barbosa1, Diogo Paes da Costa1, Fernando José Freire2 e Júlia Kuklinsky-Sobral3


Introdução
É cadavez mais explorado o potencial de bactérias associadas às plantas para controle de pragas e doenças e também para promoção de crescimento vegetal, o que enfatiza a importância da pesquisas que busquem por conhecimento nesta área [1]. Dentre os mecanismos de promoção de crescimento vegetal por bactérias, a fixação biológica de nitrogênio é uma das mais relevantes, pois o nitrogênio équantitativamente o elemento mais importante para a agricultura, por ser limitante ao crescimento vegetal [2]. Outra propriedade não menos importante é a solubilização de fosfato inorgânico pelas bactérias associadas às plantas [3]. Há também a produção de ácido indol acético (AIA), um regulador de crescimento vegetal da classe das auxinas [4]. Bactérias que habitam o interior dos tecidos vegetais podem acarretarefeitos positivos ao seu hospedeiro, por meio da promoção de crescimento vegetal [1]. Esses processos vão depender da interação estabelecida entre o genótipo da bactéria e o da planta hospedeira, bem como dos tipos de tecidos vegetais colonizados [5, 6 e 7]. Diante do exposto, o presente trabalho teve por objetivo selecionar bactérias associadas à cana-deaçúcar com características envolvidas noprocesso de promoção de crescimento vegetal. Avaliando-as para fixação de nitrogênio, solubilização de fosfato inorgânico e produção de ácido indol acético.

in vitro foi realizada por meio do crescimento em meio de cultura sem fonte de nitrogênio. Para tanto, as bactérias foram inoculadas em tubos de ensaio contendo 10mL de meio de cultura NFb, incubadas a 28oC e avaliadas após 8 dias decultivo. Os experimentos foram realizados em triplicatas e o resultado positivo foi caracterizado pela presença de um halo de crescimento no interior do meio de cultura. C. Solubilização de Fosfato Inorgânico As bactérias foram inoculadas em meio de cultura sólido, contendo fosfato insolúvel e incubadas a 28°C por 72h e, em seguida, realizadas as leituras. Os experimentos foram realizados em triplicatase a presença de um halo claro em torno da colônia indicou a solubilização do fosfato. Os diâmetros das colônias e dos halos de solubilização foram medidos com o auxílio de paquímetro para a determinação dos Índices de Solubilização (IS) por meio da fórmula: IS = d Halo (diâmetro em mm) / d Colônia (diâmetro em mm). D. Produção de ácido índol acético (AIA) As bactérias foram inoculadas em meio TSAlíquido contendo L-triptofano (5mM) e incubadas por 24 h a 28°C, sob agitação de 120 rpm. Após este período, a cultura foi tratada com o Reagente de Salkowski (2% de FeCl3 0,5 M em 35% de ácido perclórico), por pelo menos 30 min, as que apresentara coloração rosea foram caracterizadas como positivas.

Material e métodos
A. Linhagens bacterianas Foram avaliadas 131 linhagens bacterianasendofíticas, de folha e raiz, e do rizoplano de plantas de cana-de-açúcar, isoladas em meio de cultura TSA 10% (Tripcase Soy Agar), pertencentes à coleção de culturas bacterianas do Laboratório de Genética e Biotecnologia Microbiana da UAG/UFRPE. B. Fixação de Nitrogênio A seleção de bactérias com capacidade de fixar N2

Resultados e Discussão
O teste de fixação de nitrogênio in vitro permitiu aobservação da formação de um halo claro, próximo à superfície do meio, indicando que a bactéria foi capaz de obter nitrogênio da fonte atmosférica, uma vez que o meio de cultura utilizado não apresentava nenhuma fonte deste elemento. Além disso, houve uma alteração na cor do meio, de verde para azul, resultante da alteração do pH e sendo mais um indicativo de desenvolvimento microbiano (Figura 1A)....
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