Resumo t cnicas citogn tica molecular

UNIVERSIDADE DO VALE DOS SINOS
BACHARELADO EM BIOMEDICINA
Citogenética
Profª Luiza Dorfman
Trabalho integrante do Grau B: Resumo sobre
Acadêmico: Nubia Heidrich Resumo sobre Técnicas para Cariotipagem
­ Cariótipo Convencional: Feito por banda GTG, avalia morfologia dos cromossomos e padrão de bandas e branco e preto. Técnica padrão em citogenética. Feito com células em suspensão ou tecidos.
Resolução
limitada entre 3 a 5 Mb, detecta alterações numéricas e algumas estruturais.
Aplicação
em pediatria, oncologia, ginecologia e obstetrícia.
Vantagens e Desvantagens:
Não necessita de suspeita e é mais barato que técnicas moleculares. Não é possível definir a origem de alterações estruturais. ­ FISH: Uso de sondas ­ fluorocromos, que identificam determinadas regiões do genoma, ou seja, as sondas são loci­específicas, necessitam de suspeita.
Resolução: maior que a do cariótipo convencional, detecta deleções e rearranjos mais facilmente
(padrão ouro para deleções).
Aplicação: para microdeleções e microduplicações, para diagnóstico pré­natal e pré­implantacional, pesquisa e diagnóstico de câncer (até prognóstico), pois é possível identificar regiões de genes supressores de tumor e oncogenes e rearranjos cromossômicos crípticos.
Vantagens e Desvantagens: as sondas podem ser usados com núcleos interfásicos ou cromossomos.
Têm como característica serem complementares ao DNA. Utiliza células em suspensão ou tecidos.
Não necessita de cultivo celular.
Manutenção e armazenamento devem ser feitos com muito cuidado e deve­se analisar rapidamente.
Possui alto custo. ­ FISH multicolorido: mesma premissa do FISH, mas usa várias sondas diferentes para cada cromossomo, tornando possível a identificação de translocações e inserções.
Resolução:
pode variar de 80 bandas até 550 bandas, dependendo da metodologia.
Aplicações: diagnóstico pré­natal