Relat Rio Bioqu Mica 3

Universidade Estadual de Campinas
Faculdade de Engenharia de Alimentos
TA 514 – Bioquímica de Alimentos

DETERMINAÇÃO DE PROTEÍNAS PELOS MÉTODOS DE LOWRY, BIURETO E BRADFORD

GRUPO IX –
GIOVANNA PANSONATO 146260
TAMIRES BAREA PERON 147987
1.0) Introdução
2.0) Objetivos
3.0) Materiais e Métodos

3.1) Materiais
I- Determinação de proteína pelo método de Biureto
Solução de albumina de ovo 10mg/mL
Amostra 1
Amostra 2
Reagente de Biureto
Água destilada
Tubos de ensaio
Pipetas de 2mL, 5mL e 10mL
Pêras
Espectrofotômetro
II- Determinação de proteína pelo método de Lowry
Solução de albumina de ovo 0,2mg/mL;
Amostra 1;
Amostra 2;
Reagente A;
Reagente B;
Reagente C (Reagente de Folin Ciocalteau);
Pipetas de 2mL, 5mL e 10mL;
Pêras;
Tubos de ensaio;
Água destilada;
Espectrofotômetro;
Enlermeyer;
Filme plástico
III- Determinação de proteína pelo método de Bradford
Amostra 3
Reagente de Bradford
Tubos de ensaio Br1, Br2 e Br-Branco
Água destilada
Espectrofotômetro

3.2) Métodos
I - Determinação de proteína pelo método de Biureto
Preparou-se 2mL de soluções diluídas de albumina de ovo contendo 10 mg/ml B1 a B6 como descrito na tabela 1, a seguir:

Tabela 1 – Determinação de proteína pelo método de Biureto
Tubo
Proteína (mg/ml)
B1
10
B2
08
B3
06
B4
04
B5
02
B6
01

Em seguida, preparou-se diluições da amostra 1 (B7, B8 e B9) e amostra 2 (B10, B11 e B12) nas seguintes condições:

Tabela 2 : Diluições das amostras 1 e 2 - Biureto
Tubo
Diluição
B7 (amostra 1)
1:6
B8 (amostra 1)
1:10
B9 (amostra 1)
1:20
B10 (amostra 2)
1:4
B11 (amostra 2)
1:8
B12 (amostra 2)
1:12

Em seguida, foi adicionado 8mL de Reagente de Biureto nos tubos de ensaio contendo 2mL de soluções de proteínas com diferentes concentrações (B1 a B6) e nos tubos de ensaio contendo 2mL das soluções da amostra diluída (B7, B8, B9, B10, B11 e B12).
Foi feito um tubo branco com 2mL de água destilada + 8mL de Reagente de Biureto para calibração do espectrofotômetro.
As soluções foram