Relatório de bioquimica

Páginas: 6 (1339 palavras) Publicado: 29 de abril de 2013
2012/2013
Universidade da Beira Interior
2º Ano de Licenciatura em Química Medicinal
Relatório – estudo da hidrólise de compostos contendo grupos fosfato
A5.
| F0 | F1 | F2 | F3 | F4 | F5 |
[Pi] mM | 0 | 0,04 | 0,09 | 0,13 | 0,18 | 0,22 |
A750nm | 0 | 0,170 | 0,607 | 0,791 | 0,887 | 0,968 |

NOTA: Retirou-se os pontos dos tubos F2 E F3 para obter uma reta de calibração, com umcoeficiente de correlação mais elevado.
A6.
| ATP (1mM) | G-1-P | G-6-P |
Tubos | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 |
A750nm | 0,013 | 0,384 | 0,012 | 0,422 | 0,019 | 0,013 |

Cálculo da quantidade de fosfato libertado por 1mL de cada amostra:

Abs=4,6079Pi-0,0006

Tubo 1:
0,013=4,6079Pi-0,0006
Pi=0,01364,6079=0,003 mM
n=Pi×V=0,003×1=0,003μmol
Tubo 2:
0,384=4,6079Pi-0,0006
Pi=0,38344,6079=0,0832mM
n=Pi×V=0,0832×1=0,0832μmol
Tubo 3:
0,012=4,6079Pi-0,0006
Pi=0,01144,6079=0,0025 mM
n=Pi×V=0,0025×1=0,0025μmol
Tubo 4:
0,422=4,6079Pi-0,0006
Pi=0,42144,6079=0,0915 mM
n=Pi×V=0,0915×1=0,0915μmol
Tubo 5:
0,019=4,6079Pi-0,0006
Pi=0,01844,6079=0,0040 mM
n=Pi×V=0,0040×1=0,0040μmol
Tubo 6:
0,013=4,6079Pi-0,0006
Pi=0,01244,6079=0,003 mM
n=Pi×V=0,003×1=0,003μmol

A7.
| A3 (μmol) |A6 (μmol) | A3-A6 (μmol) | (A6/A3)×100 |
ATP (1mM) | 1 | 0,0832 | 0,9168 | 8,32% |
G-1-P | 1 | 0,0915 | 0,9085 | 9,15% |
G-6-P | 1 | 0,0030 | 0,9970 | 0,30% |

Os resultados obtidos em A6 não corresponderam aos resultados esperados. Os valores de absorvância dos tubos 4, 5 e 6 são diferentes dos teoricamente previstos. O tubo 4, que continha glicose-1-fosfato (G-1-P), deveria apresentaruma absorvância menor que 0,384 (absorvância do tubo 2 correspondente à solução com ATP) pois a quantidade de fosfatos libertados pela G-1-P é menor que no ATP, visto que apresenta um ΔGº mais elevado.
As absorvâncias nos tubos 5 e 6 também não correspondem ao esperado, pois o valor desta é mais elevado no tubo 5 que no tubo 6. Porém, era esperado que a absorvância e consequentemente aquantidade de fosfatos lábeis fosse superior no tubo 6, pois a glicose-6-fosfato (G-6-P) no tubo 5 não foi submetida a hidrólise, não apresentando assim fosfatos libertados.
Segundo os resultados obtidos, a quantidade de cada composto final foi menor à inicial, tal deveu-se à hidrólise destes, libertando grupos fosfatos. Contudo, comparando as diferenças de quantidade entre os três compostos, estes nãocorresponderam aos valores esperados. Seria suposto que a quantidade de ATP fosse menor que a de G-1-P depois de hidrolisados, visto que como o ΔGº deste composto é menor, tem mais facilidade em libertar os seus grupos fosfatos que, por sua vez deveriam aparecer em maior quantidade na solução. Relativamente à G-6-P, a quantidade de fosfatos lábeis na solução foi muito inferior às do ATP e G-1-P.Estes valores correspondem aos resultados previstos, na medida em que o seu ΔGº é superior ao dos compostos anteriores e consequentemente, a quantidade de fosfatos libertados deve ser inferior à do ATP e G-1-P.
No geral, os resultados obtidos não corresponderam aos esperados e tal pode dever-se à formação de bolhas na utilização das micropipetas, pipetando desta forma, diferentes volumes doscompostos utilizados nos tubos de ensaio.

A8. Os tubos 1, 3 e 5 foram colocados no gelo para que não ocorresse hidrólise dos compostos comparando assim a quantidade de fosfatos libertados em cada uma das situações (com e sem hidrólise). Nestes três tubos era esperado obter valores de absorvância iguais a zero pois não haveria fosfatos lábeis nestas soluções. Os valores obtidos apresentaramvalores muito próximos do previsto, sendo a quantidade de fosfatos muito pequena nos tubos.
No entanto, existiu uma grande discrepância no valor de absorvância do tubo 5, sendo este muito superior ao dos outros dois. Este valor não correspondeu ao esperado devendo ter apresentado um valor semelhante dos tubos 1 e 3 (Abs ≈ 0,013).

B2.
Tabela 1- Valores de absorvância a 750 nm
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