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SUMÁRIO

1. INTRODUÇÃO...................................................................................................... 4
2. DEFINIÇÃO/CONCEITO/FUNDAMENTO GERAL DA TÉCNICA DE QPCR ..... 5
3. MÉTODO DE SYBR GREEN............................................................................... 8
4. MÉTODO DE SONDAS........................................................................................ 10
5. QPCR NO DIAGNÓSTICO DE DOENÇAS INFECCIOSAS................................ 14
6. CONCLUSÃO....................................................................................................... 20
7. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS..................................................................... 21

1. INTRODUÇÃO4

A reação em cadeia da polimerase (PCR) é uma técnica fundamental nos laboratórios atuais, que revolucionou a detecção de RNA e DNA. Recentemente, uma nova técnica designada PCR em tempo real, evoluiu da técnica de PCR convencional, com o objetivo de minimizar as suas numerosas limitações. Esta técnica, também conhecida como PCR Quantitativa ou PCR em tempo real Quantitativa é um método de quantificação e amplificação simultânea do DNA. A PCR em tempo real é baseada na detecção e quantificação de um composto fluorescente (durante as primeiras fases da PCR), assentando num princípio básico de que o aumento significativo da quantidade de produto da PCR está correlacionado com a quantidade inicial do controle.
A PCR em tempo real apresenta inúmeras vantagens relativamente à PCR tradicional. A recolha de dados ocorre durante a fase exponencial de crescimento da PCR, sendo por tal uma análise rápida e simples. Trata-se de uma técnica sem influência da amplificação não específica, podendo a amplificação ser controlada em tempo real. O risco de contaminação é baixo devido à ausência de processamento pós-PCR dos produtos resultantes. Além do mais, esta técnica requer apenas três pictogramas de material, o que é cerca de