QUESTOES NAT

Páginas: 25 (6094 palavras) Publicado: 2 de setembro de 2014
BRATS

03

Boletim Brasileiro de Avaliação de Tecnologias em Saúde

Ano II nº 3 | Novembro de 2007

O TESTE DE AMPLIFICAÇÃO DE ÁCIDOS NUCLÉICOS (NAT) E AS DEMAIS ESTRATÉGIAS
PARA DETECÇÃO DOS VÍRUS HIV-1 E HCV NA TRIAGEM DE SANGUE DOADO

 Resumo
O teste de amplificação de ácidos nucléicos (NAT) é uma
tecnologia desenvolvida para a detecção do RNA e DNA de
agentes infecciosos virais,tais como o vírus da imunodeficiência humana tipo 1 (HIV-1) e da hepatite C (HCV), em
doadores de sangue destinado à transfusão.
Até o surgimento dos testes NAT, eram exclusivamente
utilizados na triagem da infecção pelo HIV e HCV em
doadores de sangue testes de detecção de anticorpos e/ou
antígenos virais por método imunoenzimático, os testes
ELISA.
Os testes NAT foram implantados com opropósito de
identificar doadores com níveis de anticorpos indetectáveis
pelos exames sorológicos convencionais.
Outras alternativas foram propostas, como os testes de detecção de antígeno viral p24 do HIV-1 e do nucleocapsídeo
do HCV, agregadas à detecção de anticorpos.
Tendo em vista a importância de se comparar as diferentes estratégias de triagem em relação aos testes NAT e
a ausência deestudos publicados sobre o tema, em especial
para a realidade brasileira, são apresentadas no presente
Boletim algumas estimativas de redução do risco residual de
transmissão dos vírus HIV-1 e HCV pelo sangue. Para estas
estimativas, foram utilizadas taxas regionais de incidência
em doadores de sangue, e os períodos de janela publicados
na literatura.
Há um número limitado de estudoscientíficos visando
à determinação do período de janela do HIV e HCV, utilizando testes imunológicos e moleculares. Os dados mais
confiáveis, obtidos em estudos de coorte prospectiva, se
baseiam em um número muito reduzido de indivíduos.
Em virtude da amplitude do risco residual estimado para
as estratégias de triagem aqui consideradas, não se pode afirmar que exista diferença significativa entre asestimativas.

É importante destacar que além das estratégias de triagem
do sangue doado, como os testes NAT, outras intervenções
que visem aumentar a segurança transfusional podem ter,
eventualmente, um impacto maior na redução do risco
residual do que a implantação de tecnologias que objetivam
estreitar a janela imunológica. Dentre tais intervenções,
encontram-se: o aprimoramento da seleção dosdoadores, o
desestímulo à doação motivada pelo acesso aos testes sorológicos, a melhoria dos sistemas de informação e a avaliação
dos incidentes relacionados ao uso de hemocomponentes.

 Tecnologia
A tecnologia de amplificação de ácidos nucléicos (NAT)
é constituída de testes in vitro qualitativos para detecção
direta do RNA e DNA de agentes infecciosos. No contexto
da triagem de doadoresde sangue total e de seus derivados
para transfusão, diferentes testes foram desenvolvidos para
a detecção do RNA ou DNA dos vírus da imunodeficiência
humana tipo 1 (HIV-1), da hepatite C (HCV) e da hepatite
B (HBV)1. Neste Boletim, os testes se referem à detecção
do RNA do HIV-1 e do HCV. Os vários métodos NAT
são constituídos basicamente por três etapas: preparação da
amostra de sangue,incluindo a extração do ácido nucléico
viral e sua purificação ou captura; amplificação do RNA ou
do DNA complementar (cDNA) alvo e detecção do produto amplificado.
A amplificação do RNA ou do cDNA alvo pode ser feita
por vários métodos, no entanto, os sistemas exclusivos para
a triagem de sangue doado que utilizam a tecnologia NAT,
aprovados pela ANVISA para HIV-1 e HCV, e comercializadosatualmente no Brasil, utilizam métodos de amplificação baseados na Reação em Cadeia da Polimerase (PCR)2
ou na Amplificação Mediada por Transcrição (TMA). Estes
sistemas servem-se de equipamentos semi-automáticos
para processamento dos mini-pools de amostras, extração
e amplificação. O sistema TMA3 emprega um único kit
que permite a detecção simultânea (multiplex) do RNA do

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