Protocolo para coleta, isolamento, cultivo e identificação de microalgas

Protocolo para coleta, isolamento, cultivo e identificação de microalgas

1. Preliminares

Antes de programar qualquer coleta torna-se necessário preparar todo o material para as várias etapas do cultivo.

✓ Reservar microscópio a ser utilizado para o isolamento, de preferência invertido e também microscópio qualitativo com sistema de captura de imagens para registro de população natural.

✓ Preparar capilares utilizando pipetas Pasteur, afunilando a ponta com o auxílio do bico de Bunsen.

✓ Autoclavar todo o material (pipetas, capilares, lâminas escavadas, vidro de relógio, tubos de ensaio, béquer, placas de petri), além do meio a ser utilizado, que deverá ser de acordo com o ambiente de coleta (marinho ou dulciaquícola).

2. Em campo

Para qualquer ambiente deverá ser obtido dados de temperatura (termômetro de campo), salinidade (refratômetro ) e pH (pHmêtro de campo). Caso o refratômetro e pHmêtro não estejam disponíveis para o trabalho de campo, reservar um frasco com fechamento hermético, coletar uma fração da água local completando até a borda do frasco e imediatamente fechá-lo para evitar a evaporação e conseqüente alteração no teor de salinidade/pH;

a) ambiente marinho

Material necessário: rede de fitoplâncton com malha de 20 µm e frascos escuros de 250/500 mL.

✓ Efetuar arrasto horizontal com a rede de fitoplâncton por aproximadamente 3 minutos, quando então a amostra colhida deverá ser acondicionada no recipiente reservado, que deverá antes ser rinsado com água do local de coleta.

✓ Verificar a temperatura da água. Para a salinidade e pH, efetuar leitura no local ou coletar amostra para posterior análise no laboratório.

Considerando que a coleta será feita sem utilização de embarcação, verificar a tábua de maré para efetuar a coleta em maré vazante, pois com a maré cheia as condições para o arrasto na beira da praia se tornam desgastantes;

b)