Procedimento para extração do ácido nucléico:

Páginas: 2 (266 palavras) Publicado: 9 de agosto de 2012
Procedimento para extração do ácido nucléico:

1. Colocar dois morangos dentro de um almofariz e acrescentar 10 mL da solução de lise.
2. Amassar os morangos como pistilo.
3. Com auxílio do êmbolo de uma seringa pressionar o morango macerado sobre uma peneira, que deve estar apoiada sobre uma placa de Petri.
4. Transferir asolução para um tubo Falcon de 50 mL com auxílio do funil.
5. Colocar a amostra em banho-maria a 60ºC por 10 minutos.
6. Acrescentar 10 mL de álcool gelado ehomogeneizar delicadamente até a formação de uma “nuvem” branca (DNA) na fase alcoólica.
7. Com o auxílio de uma alça de transferência enovelar o DNA e removê-lo.SOLUÇÃO DE LISE
- 900 mL de água
- 15 g de sal de cozinha
- 50 mL de detergente neutro

Entendendo a aula prática

→Na solução de lise estão presentes duassubstâncias importantes para o sucesso desta aula prática: o detergente, que terá a função de desorganizar as membranas lipoprotéicas das células, inclusive carioteca,permitindo desta maneira que os ácidos nucléicos sejam liberados na solução, além disso, ele irá desnaturar proteínas, dissociando os complexos ácidos nucléicos-proteínas; osal de cozinha, por sua vez, atuará na desnaturação protéica, contribuindo para melhor isolamento dos ácidos nucléicos.
→A elevação da temperatura durante oprocesso é necessária para viabilizar o aumento da eficiência da ação do detergente na desorganização das membranas e a desnaturação das DNAses (presentes nos lisossomos)responsáveis pela degradação do DNA.
→O etanol gelado é empregado com o objetivo de tornar os ácidos nucléicos insolúveis na solução e promover sua precipitação.
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