Prática de Esfregaço de Imunologia Celulas Sanguineas

Capítulo

4

COLORAÇÃO

DAS LÂMINAS

Manual de Diagnóstico Laboratorial da Malária

1. Preparo de corantes e diluentes
Preparo da mistura de azul de metileno fosfatado
Azul de metileno medicinal em pó

1,0g

Fosfato de potássio monobásico

1,0g

Fosfato de sódio bibásico

3,0g

Misturar em gral seco.
Preparo da solução fosfatada de azul de metileno
Pesar 1,0g da mistura acima e dissolver em 250ml de água destilada.
Conservar a solução em pissetas (frasco plástico de lavagem).
Preparo da mistura de sais fosfatados
Fosfato de potássio monobásico

4,0g

Fosfato de sódio bibásico

6,0g

Misturar em gral seco.
Preparo da água tamponada a 6/4
Pesar 1,0g da mistura de sais fosfatados, acima descrita, e dissolver em 1.000ml de água destilada. Conservar a solução em pissetas.
Preparo da solução alcoólica de Giemsa
Giemsa em pó
Glicerol PA
Álcool metílico PA

0,75g
35ml
65ml

Colocar a solução num frasco com algumas pérolas de vidro e agitar várias vezes ao dia, até obter a homogeneização. Esta solução deve ser feita em maior volume e mantida em estoque. Para o uso diário, a solução alcoólica deve ser colocada em pequeno frasco conta-gotas, evitando-se sua abertura por tempo prolongado.
Obs: Existem, no mercado, soluções de Giemsa preparadas, caráter
PA.

Secretaria de Vigilância em Saúde / MS

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Manual de Diagnóstico Laboratorial da Malária

Preparo do corante de Wrigth
(para coloração dos esfregaços delgados)
Wrigth em pó

0,10g

Álcool metílico PA

100ml

Colocar o corante num frasco com algumas pérolas de vidro e agitar várias vezes ao dia, até obter a homogeneização.

2. Técnica de coloração das lâminas
Método de Walker para coloração da gota espessa
Material necessário: placa de acrílico para coloração; pisseta com solução fosfatada de azul de metileno; frasco conta-gotas com solução alcoólica de Giemsa; pisseta com água tamponada.
1ª fase: Desemoglobinização pela solução