PLACAS DE PETRI ISOLADAS EM ISOFILME E FLAMBAR

Método de contagem de placas
Postado por Patricia Dias
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Aula prática de Análise Farmacêutica 2

Para garantir a qualidade dos produtos farmacêuticos é necessário ter um controle rigoroso da produção dos mesmos.
O método utilizado nessa prática foi o Método de contagem em placa. O método consiste em fazer uma diluição seriada e plaquear uma alíquota de cada diluição pelo método de espalhamento em placa. O limite de crescimento microbiológico é de 30 a 300 colônias por placa.

Para se ter um resultado fidedigno, é necessário esterilizar os materiais a ser utilizados nessa técnica.
A manipulação foi feita por trás da chama do bico de bunsen, de forma a garantir o estabelecimento de uma zona de esterilidade. É somente nesta zona estéril que os tubos ou recipientes com meios de cultura estéreis e o material a ser inoculado, foram ser abertos ou manipulados, para ser preservada a sua esterilidade.
A boca dos tubos de ensaio foi flambada imediatamente após a retirada da tampa (ou tampão de algodão).

OBJETIVO
Determinar o número de microrganismos presente na suspensão através dos métodos de contagem em placa.

MATERIAIS, REAGENTES E EQUIPAMENTOS
· Alça de inoculação;
· Algodão;
· Balança analítica;
· Bico de Bunsen;
· Caldo caseína-soja;
· Espátula;
· Estante;
· Estufa;
· Fita crepe;
· Marcador permanente;
· Micropipeta calibrada;
· Placas de Petri com meios de cultura;
· Ponteiras calibradas;
· Solução salina
· Solução tampão fosfato;
· Talco em quantidade suficiente para duplicata e triplicata;
· Tubos de diluição;
· Vidro de relógio. Observação:
· Realizar testes de esterilidade nos equipamentos e materiais antes de iniciar a amostragem.
· Calibrar os equipamentos.

PROCEDIMENTO
Preparo da amostra:
1. Pesou-se 1g de talco na balança analítica, com o auxílio de espátula e vidro de relógio
2. Mediu-se 9ml de solução tampão;
3. Colocou-se no Becker a solução