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INTRODUÇÃO:

Para a análise do DNA de celular eucarióticas, a primeira etapa é o seu isolamento. O procedimento a seguir é utilizado para extrair grandes quantidades de DNA a partir de uma cebola. Procedimentos similares são usados nas extrações de DNA de outras fontes, como amostras de sangue, tecidos, etc.
A extração de DNA de células eucariontes consta fundamentalmente de três etapas:
1º Ruptura (física e química) das membranas celulares para a liberação do material genético;
2º Desmembramento dos cromossomos em seus componentes básicos: DNA e proteínas;
3º Separação do DNA dos demais componentes celulares.

Figura 1

Figura 2

Figura3

Figura 4
MATERIAIS:
QUANTIDADE-MATERIAL
01-Espátula
01-Faca
02-Béqueres de 250ml
03-Tubo de ensaio
02-Provetas de 50ml
01-Bastão de vidro
01-Funil de vidro
01-Suporte universal
01-Anel ou argola
01-Papel filtro
01-Banho-maria 60° C

PRODUTOS/REAGENTES
01-Cebola picada
--Água filtrada
--Detergente
--NaCl (sal de cozinha)
--Álcool etílico gelado
--Gelo

PROCEDIMENTO EXPERIMENTAL:

· Com o auxílio de duas provetas, transfira 10ml de detergente e 20ml de água em um béquer de 250ml;

· Com o auxílio de uma espátula, coloque uma pitada de sal nesse mesmo béquer e agite com um bastão de vidro;
· Coloque a cebola picada nesse mesmo béquer (com a solução de lise-detergente), mexa bem e leve ao banho-maria por exatamente 15 minutos a 60°C;

· Resfrie a mistura do banho-maria, colocando o béquer no gelo por cerca de 5 minutos, mexendo periodicamente;

· Filtre a mistura, recolhendo o filtrado em um béquer limpo;

· Transfira pequenas quantidades do filtrado em tubos de ensaio limpos e secos;
· Adicione lentamente pela borda do tubo de ensaio o álcool etílico comercial gelado (aproximadamente o dobro do volume do filtrado). ATENÇÃO! ALCOOL É UM PRODUTO INFLAMÁVEL

· Espere alguns minutos.