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DETERMINAÇÃO DA TAXA DE RECUPERAÇÃO E VIABILIDADE DE
CÉLULAS MDBK APÓS CONGELAMENTO COM DIMETILSULFÓXIDO
(DMSO) OU GLICEROL.
KUNERT FILHO, H.C 1,2*.; .HOLZ, C.L.2; .DEZEN, D2.; TEIXEIRA, T.F 2.;
CIBULSKI, S.P 2.; ROEHE, P.M2,3

Resumo: O processo de criopreservação é essencial para a manutenção de cultivos celulares, uma vez que a linhagem celular é congelada, a mesma pode ser mantida em nitrogênio líquido por tempo indeterminado. Buscando melhorar a eficiência no processo de congelamento de linhagens celulares, várias substâncias têm sido avaliadas como crioprotetoras. Neste trabalho, foram comparados dois crioprotetores, dimetilsulfóxido (DMSO) e glicerol tamponado
(pH 7.0), nas concentrações de 5%, 7,5%, 10% e 12,5%. Para os ensaios da taxa de recuperação de células viáveis e de porcentagem de viabilidade após o congelamento foram utilizadas células da linhagem “Madin Darbin bovine kidney” (MDBK). A taxa de recuperação das células viáveis foi estimada por contagem das mesmas através de coloração com azul de Trypan em camara de Neubauer. A porcentagem de células viáveis foi avaliada 24 horas após o descongelamento, através do ensaio de redução do MTT (3-(4,5 dimethylthiazol-2yl)-2,5 diphenyltetrazolium bromide). Verificou-se que apesar das taxas de recuperação de células viáveis terem sido similares entre os grupos tratados, a porcentagem de viabilidade celular foi significativamente maior para células congeladas com 10% DMSO. Testes com outras linhagens celulares devem ser feitos pois o seu genótipo tem influencia quanto a tolerância e tipo de crioprotetor utilizado bem como em sua concentração.
INTRODUÇÃO
O processo de criopreservação é central para a manutenção de cultivos celulares em longo prazo. Todavia, durante o congelamento os cristais de gelo intracelulares formados causam ruptura das membranas celulares e prejudicam a viabilidade celular ao descongelamento (PICKETT, 1986).

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Acadêmico de Medicina Veterinária –