microrganismos

Técnicas De Contagem Microbiana

QUANTIFICAÇÃO DIRETA

CONTAGEM EM PLACAS

•técnica mais utilizada na determinação do tamanho da população bacteriana;

VANTAGEM:

qualificação de células viáveisDESVANTAGEM: tempo (24 h para o aparecimento das colônias)

Cálculo:

•nº de colônias na placa x índice de diluição da amostra = nº de bactérias/mL
•DILUIÇÃO SERIADA
•MÉTODO DE ESPALHAMENTO EM PLACA

FILTRAÇÃO

•nº de bactérias = pode ser utilizado o método de filtração para a sua contagem.

concentração de bactérias sobre a superfície de uma membrana de filtro de poros muito pequenos após a passagem de um volume de 100 mL de água.filtro posteriormente transferido para uma placa de Petri contendo meio sólido.

O MÉTODO DO NÚMERO MAIS PROVÁVEL (NMP)

•utilizado para microrganismos que não crescem bem em meio sólido.
A) diluição a partir de um alto volume de inóculo (ex. 10 mL)B) diluição a partir de um médio volume de inóculo (ex. 1 mL)c) diluição a partir de um baixo volume de inóculo (ex. 0,1 mL)d) contagem do nº de tubos positivose) estimativa do nº de células/mL de bactérias

CONTAGEM DIRETA AO MICROSCÓPIO

•um volume conhecido de suspensão bacteriana é colocado em uma área definida da lâmina de microscópio.
A amostra pode ser corada ou analisada a fresco utilizam câmaras de contagem

DESVANTAGENS:

•não separa células mortas e vivas
•pode haver erros de contagem
•difícil contagem para bactérias móveis

QUANTIFICAÇÃO INDIRETA

TURBIDIMETRIA

•monitoramento do crescimento bacteriano através da turbidez
•espectrofotômetro (540 -660 nm)

ATIVIDADE METABÓLICA

. quantidade de um certo produto (como ácido ou CO2) é diretamente proporcional ao número de células bacterianas.

PESO SECO

•principalmente para fungos filamentosos

a) fungo é removido do meio por filtração
b) seco em dessecador
c) posterior pesagem