Microbiologia

Universidade Federal do Rio de Janeiro

Relatório Referente à 3ª aula prática da disciplina de Microbiologia Geral

Grupo: Amanda Ferreira, Deborah Costa, Isabel Virgínia e Yasmin Moraes.
Professora: Eliane Ferreira

1)Materiais utilizados:

-Desinfetante Pinho Sol;
-Tubos cônicos de 15 mL estéreis;
-Tubos de ensaio estéreis;
-PBS 1X;
-Água estéril;
-Tubos de 1,5 mL estéreis;
-Discos de papel de filtro estéreis;
-Placas de Ágar Muller Hinton;
-Swabs;
-Estufa de 37°C;
-Escala de McFarland (1,5 x 108 UFC/mL).
-Pipetas de 1, 5 e 10 mL estéreis;
-Ponteiras de P10, P100 e P1000 estéreis;
-Pinça esteril;
-Bico de Bunsen;
-Alça microbiológica;
-Cepas bacterianas: Staphylococcus aureus e Escherichia coli.
-Ependorf

2)Objetivo:

Diagnosticar a eficácia de um desinfetante domiciliar no combate a bactérias específicas.

3)Procedimento:

3.1) Diluição do Desinfetante Nos ependorfs foram realizadas as diluições do desinfetante em água que seriam aplicadas posteriormente nos discos. Primeiro fez-se a diluição recomendada pelo fabricante, que nesse caso não foi necessário já que recomendava o uso do produto puro para desinfecção. No segundo, uma diluição de 1:10. No terceiro uma diluição de 1:100.

3.2) Preparação das Cepas Para preparar as cepas, foram colocadas em concentração de 0,5 x 108 UFC/mL em PBS em tubos com a utilização de uma alça microbiológica. O processo é repetido para as duas colônias bacterianas. Logo após, com um swab, mergulha-se o algodão no inóculo bacteriano e é feito um esfregaço em toda a superfície do Ágar Muller Hinton, de maneira que todos os quadrantes são semeados.

3.3) Alocação dos discos Após a devida semeadura, são posicionados quatro discos em áreas separadas do Ágar e marcados de acordo com a amostra a ser inoculada. Como controle negativo é colocado água pura em um dos discos. Em outro é colocado o desinfetante puro e por último são adicionadas as duas diluições, 1:10 e 1:100,