Microbiologia

Aula Prática n.º 4
Métodos de identificação e caracterização: principais provas bioquímicas; sistemas automatizados. Outros métodos de identificação e caracterização de isolados: métodos imunológicos e de biologia molecular.

CULTURA DE MICRORGANISMOS - PROVAS BIOQUÍMICAS

Conhecer princípios e procedimentos de diversas provas bioquímicas usadas na identificação de microrganismos.
Analisar as provas bioquímicas realizadas (leituras directas e indirectas).

TEXTO DE APOIO:

Provas fermentativas
Prova ONPG
Prova de Kligler (agar Kligler) ou agar Triple Sugar Iron (TSI)
Hidrólise do amido

Prova do sulfureto de hidrogénio (H2S)
Hidrólise da gelatina
Hidrólise da caseína
Prova IMViC
Prova do indol
Prova do vermelho de metilo
Prova de Voges-Proskauer
Prova da utilização do citrato

Descarboxilação da lisina
Desaminação da fenilalanina
Prova da redução dos nitratos
Prova da urease
Prova das oxídases
Prova da catálase
Prova da coagulase

ACTIVIDADES BIOQUÍMICAS DOS MICRORGANISMOS

Os microrganismos efectuam as suas variadas actividades bioquímicas utilizando nutrientes obtidos a partir do ambiente que os rodeia. Essas reacções bioquímicas que ocorrem dentro ou fora dos microrganismos são catalisadas por enzimas. No laboratório, é possível demonstrar algumas das actividades bioquímicas através da observação da capacidade dos microrganismos usarem enzimas para degradar hidratos de carbono, lipidos, proteínas e aminoácidos. Geralmente, a metabolização destas moléculas orgânicas origina produtos finais cuja detecção pode ajudar na caracterização e identificação dos microrganismos.

Hidratos de carbono

Provas fermentativas As fermentações são reacções bioquímicas produtoras de energia em que moléculas orgânicas servem como aceitadores e dadores de electrões. A capacidade dos microrganismos fermentarem hidratos de carbono e os tipos de produtos formados são úteis na sua identificação. Um determinado hidrato de carbono pode