Material de transgenico feijao

CULTURA DE TECIDOS DE FEIJOEIRO
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VISANDO ¿ INTRODU«√O DE GENES EX”GENOS
LEILA MARIA O. BARROS2, MARIA 1. CONCEI«√O S. GAMA', CHRISTINA H. R. DE P. GON«ALVES',
CRISTINE CHAVES BARRETO 2, ELIANA E. SANTANA' e VERA TAVARES DE C. CARNEIRO 3
RESUMO - O objetivo deste trabalho foi determinar par‚metros da cultura de tecidos de feijoeiro necess·rios para a aplicaÁ„o da tÈcnica de transformaÁ„o via Agrobaclerium. Diversos genÛtipos de feijoeiro (Phaseolus vulgaris L.) foram cultivados ti vitro. Alguns par‚metros visando ‡ infecÁ„o de
·pices caulinares com Agrobacteriuin tumefaciens foram otimizados, como a eliminaÁ„o da agrobactÈria apÛs a co-cultura e a concentraÁ„o de kananiicina suficiente para a seleÁ„o dos ·pices infectados.
MultibrotaÁıes em nÛs cotiledonares foram obtidas com freq¸Íncia de atÈ 55,7%, dependendo do genÛtipo utilizado. Estes nÛs foram infectados com A. wmefaciens contendo em seu plasmÌdeo Ti o gene da 3-glucuronidase (GUS) sob regulaÁ„o de promotor eucariÛtico. Entre as multibrotaÁıes obti- das, 30% apresentaram regi„o onde foi detectada atividade do gene GUS. Demonstrou-se tambÈm a susceptibilidade de feijoeiro a Agrobacterium rhizogenes. RaÌzes transgÍnicas foram obtidas apÛs infecÁ„o de epicÛtilos.
Termos para indexaÁ„o: Phaseolus vulgaris, cultura iii vitro, Agrobacterium.
BEAN TISSUE CULTURE FOR INTRODUCTION OF FOREIGN GENES
ABSTRACT - The objective of this work was to determine different bean tissue culture parameters necessary to the application of Agrobacteriu,n-mediated transformation technique. Several bean
(Phaseolus vulgaris L.) genotypes were cultured ti vitro. The protocols for Agrobacterium elimina- tion, alter infection of the apical meristems with Agrobacterium tumefaciens and the selective kana- mycin concentration were determined. Depending on the genotype, multiple buds were obtained from cotiledonary nodes in a frequency up to 55.7%. The cotiledonary nodes were infected with A. tumefaciens cartying in the