GENETICA

• PCR
Sigla de polymerase chain reaction, ou reação em cadeia da polimerase. Reação de extensão de DNA que emprega dois primers que hibridizam próximos um ao outro na fita de DNA molde (ou alvo), e permitem a produção de milhões de cópias do fragmento de DNA situado entre os dois primers Primers: iniciadores da síntese de DNA, são pequenos oligonucleotídeos sintéticos fita simples (de DNA). O primer vai hibridizar (ou parear) com uma fita do DNA alvo dupla fita. Para o PCR emprega-se em geral dois primers. Para o sequenciamento de DNA sempre um primer é empregado de cada vez. Tanto para PCR como para sequenciamento os primers costumam ter entre 10 e 25 bases. dNTPs: desoxinucleotídeos trifosfatados. Precursores da síntese de DNA, são empregados para a extensão de fitas simples in vitro pela ação de uma DNA polimerase, a partir de primers e DNA moldes adicionados ao sistema.
Hibridização: O pareamento de duas moléculas de DNA fita simples através da complementariedade de bases, seguindo a regra de Chargaff (A-T, G-C). Aplica-se a mesma designação para o pareamento RNA-DNA ou RNA-RNA. Passos da PCR: 1º Síntese química de dois oligonucleotídeos de DNA (iniciadores) complementares as extremidades de cada fita de DNA, flanqueando a região de interesse. 2° Ciclo de PCR 3° Desnaturação por calor (95°C), que promove a separação da fita dupla de DNA, por 1 minuto. 4º Hibridização dos iniciadores (primers) a 54ºC por 45 segundos. 5º Polimerização das fitas de DNA realizada pela DNA polimerase (usa-se a Taq. Polimerase) por 2 minutos. 6º Isso se repete por cerca de 20 a 30 ciclos.

Engenharia genética - ferramentas A engenharia genética baseia-se num conjunto de técnicas e ferramentas que permite a intervenção no genoma de um organismo construindo novos genomas por recombinação de segmentos genómicos de um mesmo ou de diferentes cromossomas.
Enzimas de restrição - São capazes de reconhecer pequenas sequências especificas de