Fatores que interferem na qualidade do dna extraído de amostras biológicas armazenadas em blocos de parafina

Páginas: 25 (6218 palavras) Publicado: 3 de junho de 2013
J Bras Patol Med Lab • v. 47 • n. 5 • p. 541-548 • outubro 2011

artigo de reVisão review article

Fatores que interferem na qualidade do DNA extraído de amostras biológicas armazenadas em blocos de parafina
Factors that affect the quality of DNA extracted from biological samples stored in paraffin blocks

Primeira submissão em 19/01/11 Última submissão em 20/07/11 Aceito para publicaçãoem 26/07/11 Publicado em 20/10/11

Anderson Paulo Scorsato1; José Ederaldo Queiroz Telles2

unitermos
Tecido Parafina DNA Formol Qualidade

resumo
Os avanços tecnológicos e metodológicos da biologia molecular criaram a possibilidade de obter DNA de amostras teciduais estocadas em blocos de parafina, alternativa esta que permite estudos retrospectivos de grandes bancos de tecidos contendoinúmeras doenças raras. O objetivo deste trabalho foi a realização de uma breve revisão de alguns fatores inerentes à qualidade do produto extraído proveniente de blocos de parafina armazenados. Os processos envolvidos nas fases de prefixação, fixação, pós-fixação apresentam aspectos que são causa de resultados de produtos finais insatisfatórios. Na fase de prefixação, alterações bioquímicasinfluenciam na preservação das macromoléculas. As mudanças moleculares causadas pelos fixadores para evitar autólise celular podem ser um limitante no momento da extração de DNA. A qualidade do DNA obtido nas duas primeiras fases é considerada importante para os procedimentos de pós-fixação (extração e purificação do DNA). Existem na literatura vários protocolos, com diferentes passos que podem sermodificados, para a obtenção de DNA de material parafinado. Assim, a compreensão das reações em cada fase é importante para solucionar ou minimizar problemas, que influenciam na qualidade das macromoléculas de DNA.

abstract
Technological and methodological advances in molecular biology have enabled the obtainment of DNA from paraffin embedded tissue, thus allowing the use of extensive pathologicalarchive sources and samples of uncommon diseases in retrospective studies. The aim of this work was to carry out a brief review of some factors inherent in the quality of product from paraffin embedded material. The processes involved in the pre-fixation, fixation and post-fixation phases have several aspects that may result in unsatisfactory final products. In the pre-fixation phase, biochemicalchanges influence the preservation of macromolecules. The molecular changes caused by fixation, an attempt to prevent cell autolysis, may be a limiting factor at the time of DNA extraction. The quality of DNA obtained in the first two phases is regarded important for post-fixation procedures (DNA extraction and purification). In the literature there are several protocols whose steps can be modifiedto obtain DNA from paraffin embedded material. Therefore, the understanding of reactions at each stage is important in order to solve or minimize problems that interfere in the quality of DNA macromolecules.

key words
Tissue Paraffin DNA Formal Quality

1. Mestre em Microbiologia, Parasitologia e Patologia; pesquisador colaborador da Universidade Federal do Paraná (UFPR). 2. Doutor emMedicina Interna e Terapêutica; professor do Departamento de Patologia Médica da UFPR.

541

SCORSATO, A. P.; TELLES, J. E. Q. Fatores que interferem na qualidade do DNA extraído de amostras biológicas armazenadas em blocos de parafina • J Bras Patol Med Lab • v. 47 • n. 5 • p. 541-548 • outubro 2011

Introdução
Os avanços tecnológicos e metodológicos dos últimos tempos ampliaram a utilizaçãodos blocos de parafina. O que inicialmente era apenas fonte de estudos histomorfológicos passou a ganhar a atenção de pesquisadores da área de biologia molecular. A evolução do diagnóstico molecular faz com que esse tipo de material seja requisitado como fonte de estudo. A obtenção de macromoléculas de amostras biológicas incluídas em parafina possibilita estudos de genes terapêuticos e estudos...
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