Extração de ácidos nucléicos

Sociedade de Educação do Vale do Ipojuca S.A. – SESVALI
Faculdade do Vale do Ipojuca – FAVIP
Curso de Graduação em Nutrição

Alyne Francine Teodoro de Sousa
Turma 1202

EXTRAÇÃO DE ÁCIDOS NUCLÉICOS

CARUARU
2012.2
Introdução

Vou abordar como extrair o DNA das células da cebola. O bulbo de cebola apresenta células grandes, que se rompem facilmente quando a cebola é picada. A precipitação do DNA em etanol na presença de cátions monovalentes é o método mais utilizado para purificar e concentrar ácidos nucleicos. Durante a extração do DNA seguiremos fundamentalmente as seguintes etapas: a) ruptura das células para liberação dos núcleos (lise); b) desmembramento dos cromossomos em seus componentes básicos (desnaturação); c) separação do DNA dos demais componentes celulares (purificação ou extração propriamente dita). O detergente desintegra os núcleos e os cromossomos das células da cebola, liberando o DNA. A filtração é utilizada para separar as macromoléculas que são desnaturadas pela ação do detergente, além dos tecidos da cebola, do DNA que se mantém solúvel na fase aquosa. O álcool gelado, em ambiente salino, faz com que as moléculas de DNA se aglutinem, formando uma massa filamentosa e esbranquiçada.

Objetivos

Objetivo principal • Extrair o ácido desoxirribonucleico de Allium cepa a partir da utilização de detergentes e solventes orgânicos;

Objetivos específicos

• Fixar conceitos básicos relativos à estrutura do DNA e dos cromossomos;
• Visualizar, ainda que macroscopicamente, o aspecto do material genético;

Material e Método

• 05 bastões de vidro
• 05 béqueres de vidro de 250 mL
• 05 cebolas grandes
• Álcool etílico 95% gelado (-10ºC)
• Banho-maria ou estufa (60ºC)
• Colher de chá
• Colher de sopa
• Detergente para loucas
• Faca de cozinha ou estiletes
• Funil de vidro
• Gelo moído
• Sal de cozinha