Extração de DNA do morango e do fígado de boi

Páginas: 2 (489 palavras) Publicado: 17 de setembro de 2014
Extração de DNA do morango
Materiais:
Morango
Becker plástico de 250 ml
Solução de lise (5,0 ml detergente; 3,5 NaCl; 50 ml água qsp)
Banho Maria
Geladeira
Gaze
Etanol
Palito
ProvetaMetodologia
Macerar 5 morangos para no Becker com o auxilio do pistilo para o rompimento da parede celular e aumento da superfície de contato;
Adicionar 50 ml solução de lise para rompimento damembrana plasmática. Misturar bem a solução;
Aquecer a solução em banho-maria a 70°C por 5 minutos;
Banho de gelo na geladeira por 10 minutos;
Filtrar a solução com gaze em um novo recipiente limpo;Adição, igual volume do filtrado, de etanol gelado;
Introduzir o palito para pegar o DNA e sua visualização.







Extração de DNA do fígado
Materiais
Vortex
Figado
Solução TD1
TudoDryBeadtuber (possui esperas)
Fita Adesiva
Coluna de sílica (Filtro)
Centrifugador
Solução TD2
Pipetas
Solução TD3
Tubo de coleta2ml
Método
Adicionar o fígado no tubo DryBead juntamente com 700ɥl da solução TD1 e vortex em seguida para misturar;
Fixar o tudo DryBead com fita adesiva no vortex e vortexe por 10 minutos;
Remova o tudo DryBead do vortex e centrifugue a 14000 rpm por minuto;Transferir todo volume da amostra para a coluna sílica (filtro) evitando as esferas. Em seguida centrifugar a 1400 rpm por 30 segundos. Após centrifugar, retirar o tubo e descartar o liquido filtrado;Adicionar 400ɥl de solução TD2 e centrifugar a 14000 rpm por 30; segundos. Descartar o liquido filtrado;
Centrifugar a 14000 rpm por 1 minuto para remover o liquido residual;
Transferir a coluna desílica para um novo tubo de coleta de 2ml;
Adicionar 50ɥl da solução TD3 no centro da membrana do filtro branco;
Centrifugar a 14000 rpm por 30 segundos. Descarte do filtro;
Conservar o tubo nageladeira até a eletroforese.

Extração de DNA
Materiais:
Solução hemolizante
Sangue
Tubo de 1,5ml
Incubadora
Centrifugadora
Vórtex
Banho Maria
Estante Magnética
Pipetas
Tampão de lise...
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