Elisa

TESTE ELISA DIRETO E INDIRETO:

ELISA vem do inglês Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (Ensaio de Imunoabsorção Ligado a Enzima) e baseia-se na identificação de anticorpos e/ou antígenos, por anticorpos marcados com uma enzima, de maneira que esta enzima age sobre um substrato e a reação faz com que o cromógeno (microrganismo que produz coloração no meio onde se encontra) mude de cor.

ELISA Indireto:
Primeiramente, o antígeno é adicionado à placa de ELISA e se adere á superfície, em seguida é realizada uma lavagem para retirar os antígenos que não estão aderidos à placa, após a lavagem o soro com anticorpos específicos para esse antígeno é adicionado e se ligarão a estes antígenos. É feita mais uma lavagem para retiram os anticorpos que não se ligaram a nenhum antígeno. Depois, são adicionados anticorpos secundários com enzima que se ligam aos anticorpos primários e faz-se uma nova lavagem para retirar esses anticorpos secundários que não se ligaram a nenhum anticorpo. É então adicionado um substrato que reage com as enzimas, mudando a cor da solução. Quando o resultado do teste é negativo, não há enzima para reagir com a solução, não havendo a mudança de cor.
Aplicações do ELISA Indireto: diagnóstico sorológico da Doença de Chagas e diagnóstico da Leishmaniose.

ELISA Direto:
Adiciona-se a placa de ELISA anticorpos anti-interferon conhecido para determinado vírus que se aderem à placa, é realizada a primeira lavagem que retira os anticorpos que não se aderiram. Adiciona-se então a amostra com antígenos que está sendo pesquisada, e os antígenos se ligam aos anticorpos aderidos, faz-se a segunda lavagem que retirará os antígenos que não se ligaram aos anticorpos. Após a segunda lavagem, adicionam-se anticorpos secundários, que possuem enzimas, com afinidade por antígenos que se liga a eles. Os anticorpos secundários que não se ligaram a nenhum antígeno são retirados na terceira lavagem. É então adicionado o substrato que reage com a enzima dos